蛇莓杀蚊幼活性成分研究

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淡色库蚊Culex pipiens pallens和白纹伊蚊Aedes albopictus是两种常见的吸血蚊虫,它们传播多种疾病,严重危害人类的健康。植物中含有丰富的生物活性化合物,具有对人畜安全、环境友好、易降解及蚊虫对其不易产生抗性的优点。从中筛选出高效低毒的活性物质并开发成高效环保型植物源杀蚊幼剂,成为新农药研究与开发的热点之一。西北农林科技大学无公害农药研究服务中心前期发现蛇莓对淡色库蚊幼虫具有较好的杀蚊幼活性,为明确蛇莓Duchesnea indica (Andr) Focke的杀蚊幼活性成分,本论文在前期研究的基础上,采用活性跟踪法,对蛇莓中的活性成分进行了提取、分离、鉴定和杀蚊幼活性研究。取得以下主要结果:1、蛇莓95%乙醇提取物水悬浮液的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取物对淡色库蚊和白纹伊蚊3龄幼虫均具一定生物活性。采用浸渍法,乙酸乙酯萃取物24h处理,淡色库蚊和白纹伊蚊3龄幼虫的死亡率分别为66.7%和62.2%;正丁醇萃取物24h处理,分别为69.3%和57.8%,乙酸乙酯萃取物对淡色库蚊和白纹伊蚊3龄幼虫LC50值分别为459.12和438.09mg/L,正丁醇为471.41和430.81mg/L,显示较好的杀蚊幼活性,且乙酸乙酯相和正丁醇相差异性不显著。2、采用活性跟踪法,运用硅胶柱层析、结晶、重结晶等分离纯化技术,对蛇莓乙醇提取物进行活性成分分离、鉴定。得到11个化合物,鉴定出10个。结构鉴定为:H1:β-谷甾醇(sitosterol),H2:叶绿醇(phytol),H3:十六烷酸(octadecanoic acid),H4:没食子酸(gallic acid),H5:十八烷酸(stearic acid),H7:山奈酚(kaemprofel),H8:熊果酸(ursolicacid),H9:齐墩果酸(oleanolic acid),H10:芹菜素(apigenin),H11:4,2’,4’-三羟基查耳酮(isoliquiritigenin)。其中4,2’,4’-三羟基查耳酮为首次从蛇莓中分离得到。3、测定了11种化合物对淡色库蚊和白纹伊蚊幼虫的杀蚊幼活性。结果表明,齐墩果酸对淡色库蚊和白纹伊蚊3龄幼虫24h处理校正死亡率分别为88.9%和91.1%,48h处理分别为93.3%和97.8%,芹菜素对淡色库蚊和白纹伊蚊3龄幼虫24h处理校正死亡率分别为68.9%和75.6%,48h处理分别为77.8%和82.2%,和其它化合物相比,显示出较好的杀蚊幼活性。进一步测定结果表明,齐墩果酸对淡色库蚊和白纹伊蚊3龄幼虫24h处理,LC50值分别为25.36和22.31mg/L,芹菜素对淡色库蚊和白纹伊蚊3龄幼虫24h处理,LC50值分别为31.29和27.22mg/L。上述结果表明,蛇莓中杀蚊幼活性成分较为复杂,作用方式多样。齐墩果酸和芹菜素对淡色库蚊和白纹伊蚊3龄幼虫有较好的活性,值得进一步探讨,蛇莓中所含的其他杀蚊幼活性成分有待进一步分离测试。
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