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研究背景及目的缺血性脑卒中是一种局部脑组织区域血液供应障碍性疾病,其有较高的发病率、致残率及复发率,对健康造成了极大威胁。我国是脑卒中发病率最高的国家之一。颅内动脉粥样硬化是导致缺血性脑卒中发生的最常见的原因之一。C反应蛋白是一种急性期反应蛋白,是动脉粥样硬化发生的标志物之一,同时也可以促进动脉粥样硬化的发生发展。环境因素和遗传因素可以通过影响C反应蛋白的表达,从而影响缺血性脑卒中的发生。全基因组关联分析(GWAS)研究报道了几种影响C反应蛋白水平的基因,主要包括:C反应蛋白基因(CRP基因),肝细胞核因子1a基因(HNF1A基因),载脂蛋白E基因(ApoE基因),瘦素受体基因(LEPR基因),白细胞介素6基因(IL-6基因),精氨酸酶I基因(ARGI基因)。基于GWAS研究报道结果,国内外针对与C反应蛋白相关的缺血性脑卒中易感基因的研究众多。然而,关于C反应蛋白相关基因对缺血性脑卒中的遗传作用仍不明确,有待进一步阐明。以往国内外有关缺血性脑卒中的易感基因研究中,往往采用单个基因、少数位点作为研究指标,并且在分析基因与环境的交互作用时,选择的环境因素也往往比较单一。因此,本研究采用巢式病例对照研究,在前期GWAS报道的6个与C反应蛋白相关基因的基础上,筛选出11个相关SNP位点,探讨C反应蛋白相关基因多态性与缺血性脑卒中发病风险的关系,探讨基因多态性与多种环境因素的交互作用,同时建立遗传风险评分,来综合评价基因多态性与缺血性脑卒中的关联。材料与方法本研究采用巢式病例对照研究设计。队列建立于2010年4月-2011年9月,共纳入15,236人,经过问卷调查获得队列人群的基线信息,并抽取10ml外周静脉血保存于-800C的冰箱中。在随访期间内(即2011年10月-2017年7月),以明确诊断的新发的动脉粥样硬化性缺血性脑卒中患者为病例组,共有141例。同时,从同一个队列中选择随访期内未发生脑卒中、心血管疾病、肿瘤、肾功能不全等疾病的正常个体为对照组,对照组与病例组按同性别、年龄±2岁的匹配条件进行1:2匹配,共纳入282例。提取两组研究对象的基因组DNA,采用第二代测序技术,在6个基因(CRP基因,HNF1A基因,ApoE基因,LEPR基因,IL-6基因,ARGI基因)的蛋白质编码区,筛选出了 1 1个SNP位点并进行分型。使用SAS9.4软件进行统计分析。连续性变量分布描述指标采用中位数和四分位数间距。分类变量,采用率(%)描述其分布。病例对照间的比较,连续型变量采用Wilcoxon秩和检验,分类变量采用Pearson χ2检验。采用多因素条件logistic回归,计算各个基因多态性位点的三种遗传模型(加性、显性、隐性模型),分析基因多态性与缺血性脑卒中发病风险的关联。采用叉生分析研究基因多态性和环境因素的交互作用。分别按照简单相加(SC-GRS)及权重相加(OR-GRS)的方法计算遗传风险评分,比较不同评分组别缺血性脑卒中发病风险的差异。研究结果排除了 3例DNA提取不合格的病例以及与其相对应的6例对照,病例组最终纳入138人,对照组纳入276人。病例组和对照组在BMI,水果蔬菜摄入,禽肉摄入分布差别有统计学意义。CRP基因中rs1800947与缺血性脑卒中的发病风险有关,且具有统计学意义(加性模型:OR=2.231,95%CI:1.005,4.951)。HNF1A 基因中 rs1169288 与缺血性脑卒中的发病风险有关,且具有统计学意义(加性模型:OR=1.487,95%CI:1.002-2.207;显性模型:OR=1.386,95%CI=1.001-2.109;隐性模型:OR=1.641,95%CI=1.013-2.207)。ApoE基因中rs440446与缺血性脑卒中的发病风险有关,且具有统计学意义(加性模型:OR=0.611,95%CI:0.385,0.972;显性模型:OR=0.646,95%CI=0.396-0.985;隐性模型:OR=0.483,95%CI=0.238-0.798)。基因多态性与环境因素的交互作用结果显示,CRP基因rs1800947,HNF1A基因rs1169288,均与吸烟、饮茶、水果蔬菜摄入、畜肉摄入存在交互作用(P<0.05),APOE基因rs440446与吸烟存在交互作用(P<0.05)。SC-GRS和OR-GRS结果均表明,缺血性脑卒中的发病风险和遗传风险评分呈剂量反应关系,即随着遗传风险评分值的增加,缺血性脑卒中发病风险增大,且具有统计学意义(趋势性P<0.05)。研究结论CRP rs1800947,HNF1a rs1169288,APOE rs440446与缺血性脑卒中发病风险存在关联;CRP rs1800947,HNF1A rs1169288与吸烟、饮茶、水果蔬菜摄入、畜肉摄入存在交互作用,APOE rs440446与吸烟存在交互作用;缺血性脑卒中遗传风险评分(SC-GRS和OR-GRS)与缺血性脑卒中发病风险存在剂量反应关系。