EBV与人鼻咽癌的基因表达谱并初步探讨鼻咽癌转移分子机制

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本研究首先利用由oligo6.0,NCBIBlast和PrimerPremier5软件去设计和筛选全EBV基因组cDNA探针,我们将这些探针的长度限定在300-600mer。然后,通过PCR和RT-PCR方法从B95-8细胞和NPC组织的基因组DNA和RNA中扩增这些探针,接着克隆入T/A克隆载体和测序鉴定。探针通过一对设计于载体多克隆两端的引物进行PCR扩增。产物纯化后,探针被打印在Corning玻片上。通过与Cy3标记的B95-8细胞cDNA进行杂交反应,B95-8细胞内EBV基因表达被检测。随后,基因芯片结果采用了两种方法分别进行了验证。 进一步利用3组基因芯片数据,从肿瘤的血管生成、细胞的黏附、蛋白激酶、NEM1转移抑制基因等方面去研究鼻咽癌的转移机制,以及筛选与鼻咽癌转移相关的基因。HGF、BPAG1、VLA-2、CTSD、MMP1等基因能作为血管生成、黏附分子及其受体、蛋白激酶的代表基因,正向调控鼻咽癌细胞的转移。而COL18A1、NEM1等基因作为负性调控基因抑制肿瘤的转移。 总结了肿瘤的转移是一个复杂、连续和可调节的过程,其中涉及了多个宿主与肿瘤之间的相互作用,也涉及了许多的基因参与。随着这些基因在鼻咽癌转移过程中功能逐渐确定,这将有可能导致新的治疗谋略发展的结论。
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