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目的评价重组人β-防御素3（rhBD3）对新生大鼠坏死性小肠结肠炎（NEC）模型的干预作用，并探讨Rho-ROCK信号通路和细胞内钙离子在rhBD3干预NEC中可能的分子机制。方法体外实验以人和大鼠肠上皮细胞Caco-2和IEC-6为研究对象，观察rhBD3对肠上皮细胞的毒性作用、诱导肠上皮细胞迁移和增生的作用（CCK-8、BrdU掺入实验、细胞周期检测、划痕实验和RTCA）。检测趋化因子受体CCR6在大鼠小肠和结肠中的表达情况。通过中和抗体、抑制剂和siRNA预处理观察CCR6介导rhBD3诱导肠上皮细胞迁移中的作用。并通过沉淀实验、细胞免疫荧光染色、Western Blot等方法检测rhBD3处理后细胞内钙离子浓度、RhoA的活性水平、MLC2磷酸化、以及F-actin的表达。然后联合人工喂养+缺氧+冷刺激作用于新生SD大鼠建立NEC模型，并通过肠道组织病理检查证实模型的可靠性和成功率。体内实验以新生大鼠NEC模型为研究对象，实验分组：A组为正常组（经胃管注入生理盐水），B组为正常rhBD3干预组（经胃管注入rhBD3），C组为NEC模型组（经胃管注入生理盐水），D组为NEC模型rhBD3干预组（经胃管注入rhBD3），收集肠管和血液标本。利用real-time PCR、ELISA和免疫组织化学染色等方法检测肠壁组织和血清中炎症因子的表达、肠壁粘膜屏障的完整性、以及肠上皮细胞迁移和增生的情况。结果rhBD3在一定的pH范围内（pH5.8-pH8.5）仍保持抗菌活性，对肠上皮细胞无明显毒性作用，在体内和体外均能诱导肠上皮细胞的迁移，但是对增生无明显促进作用。趋化因子受体CCR6在新生大鼠和成年大鼠的小肠和结肠中稳定表达。rhBD3通过细胞跨膜受体CCR6，激活细胞内小分子GTP结合蛋白Rho（由Rho-GDP转变为Rho-GTP），通过下游效应分子Rho激酶磷酸化肌球蛋白轻链MLC2（Ser19），增加肠上皮细胞中纤维状肌动蛋白F-actin的表达，同时通过动员细胞内钙离子，调节细胞骨架的重组和细胞的迁移。在成功建立新生SD大鼠NEC模型的基础上，发现rhBD3对正常新生大鼠无明显影响，但能够维持NEC模型大鼠的体重、降低NEC发病率（P=0.039）、提高生存率（P<0.001）、改善NEC疾病的严重程度（P=0.01）。其次，rhBD3可以降低肠壁组织和血清中炎症因子的表达、增加血清中DAO的水平、并增加紧密连接蛋白ZO-1的表达。结论小分子抗菌肽rhBD3能够通过趋化因子受体CCR6动员细胞内钙离子和激活Rho-ROCK信号通路，诱导肠上皮细胞的迁移。经胃管给予rhBD3对新生大鼠NEC模型具有一定的保护作用，其机制可能与降低炎症介质的表达、促进肠道粘膜屏障的修复以及保持肠道粘膜屏障的完整性有关。