不同转移潜能喉癌细胞株的分离及生物学特性比较

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:infoerp2009
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目的获得高侵袭性喉癌细胞株,为建立高转移喉癌动物模型奠定基础。方法改良侵袭实验筛选出高低两种侵袭潜能喉癌细胞亚群,通过检测两种侵袭潜能喉癌细胞亚群的生长曲线、倍增时间和流式细胞术来测定两种细胞的生长和周期差异;采用侵袭实验、迁移实验检测两种侵袭潜能喉癌细胞亚群的侵袭和迁移能力的差异;各取5只裸鼠进行移植瘤接种动物实验来检测两种侵袭潜能喉癌细胞亚群在体内肿瘤生长和转移能力的差异。RT-PCR及免疫组化检测两种侵袭潜能喉癌细胞亚群VEGF-C的表达差异。结果经过改良侵袭实验筛选出了高低两种侵袭潜能细胞亚群,高侵袭潜能细胞亚群倍增时间为31.64±1.08 h,低侵袭潜能细胞亚群倍增时间为60.24±11.09 h(P<0.05);高侵袭潜能细胞亚群增殖指数为(27.56±0.51)%,低侵袭潜能细胞亚群增殖指数为(16.25±0.81)%(P<0.01);高侵袭潜能细胞亚群侵袭细胞数为210.20±12.93,低侵袭潜能细胞亚群侵袭细胞数为11.60±4.98(P<0.01);高侵袭潜能细胞亚群迁移细胞数为229.80±12.07,低侵袭潜能细胞亚群迁移细胞数为6.00±4.53(P<0.01)。动物实验中,高低侵袭组在裸鼠体内的成瘤时间分别为2周和4周,第5周处死后解剖及病理检查结果,高侵袭组3只同侧腘窝淋巴结转移、4只同侧腹股沟淋巴结转移、1只对侧腹股沟淋巴结转移;低侵袭组1只同侧腹股沟淋巴结反应性增生,2只同侧腹股沟淋巴结转移;高侵袭潜能组瘤重为(17.0±3.0)mg,低侵袭潜能组瘤重为(9.7±3.8)mg(P<0.05);高侵袭潜能组瘤内血管数为21.2±4.0,低侵袭潜能组瘤内血管数为1.4±0.9 (P<0.01)。高侵袭潜能组VEGF-C的mRNA及蛋白质的表达均较低侵袭潜能组更多(P<0.05)。结论成功从喉癌同一亲本细胞系中分离得到了高低两种侵袭潜能细胞亚群,高侵袭性亚群的增值能力、侵袭性和转移能力均高于低侵袭性亚群,其恶性程度高于低侵袭性亚群。原因可能是高侵袭性亚群表达更多的VEGF-C。
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