【摘 要】
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目的:1.观察注射用红花黄色素对高脂血症模型小鼠血脂水平的影响。2.通过网络药理学筛选出注射用红花黄色素治疗高脂血症的关键靶点及可能机制。3.基于网络药理学分析,检测PPAR信号通路中关键蛋白表达情况,探讨注射用红花黄色素治疗高脂血症的潜在作用机制。方法:1.选用SPF级小鼠70只,基础饲料喂食,正常饮水、自由进食,随机分组为空白组（15只）和高脂组（55只）,空白组每日灌服同体积生理盐水,高脂组
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目的:1.观察注射用红花黄色素对高脂血症模型小鼠血脂水平的影响。2.通过网络药理学筛选出注射用红花黄色素治疗高脂血症的关键靶点及可能机制。3.基于网络药理学分析,检测PPAR信号通路中关键蛋白表达情况,探讨注射用红花黄色素治疗高脂血症的潜在作用机制。方法:1.选用SPF级小鼠70只,基础饲料喂食,正常饮水、自由进食,随机分组为空白组（15只）和高脂组（55只）,空白组每日灌服同体积生理盐水,高脂组灌服脂乳剂,复制高脂血症动物模型。3周后,检测动物血脂水平,确认高脂血症模型造模成功后,用于本实验研究。空白组动物作为本研究空白对照组。造模成功后的动物依据体质量随机分配为模型组、非诺贝特组（26 mg/kg）、注射用红花黄色素高剂量组（26 mg/kg）、注射用红花黄色素低剂量组（13 mg/kg）,每组12只,采用普通饲料喂养,模型组及各给药组采用高脂乳剂灌胃法继续造模,各组小鼠上午水或脂乳剂灌胃,下午腹腔注射水或相应药物,连续21 d,每日1次。每天记录小鼠进食量,每周测量小鼠体质量,于末次给药2小时后进行麻醉取血,分离血清,检测各组血脂指标、氧化指标;分离肝脏,称重,计算肝脏指数;HE染色观察肝组织病理形态学变化。2.基于上述实验研究进行网络药理学分析。通过药物数据库得到有效成分作用靶点。检索疾病数据库收集高脂血症的疾病靶点。运用Venny平台将疾病靶点与成分靶点取交集,得到注射用红花黄色素治疗高脂血症的潜在治疗靶点。对得到的交集靶点构建蛋白质相互作用网络（PPI）,分析蛋白互作关系;进行GO功能和KEGG通路富集分析。3.应用ELISA测定脂质代谢相关酶及影响相关酶蛋白的水平,选取4个CHO代谢中重要的基因靶点,且在PPAR信号通路上存在的蛋白进行Wes tern Blot（WB）检测:PP ARγ、LXRα、CYP7A1、AB CA1等。结果:1.注射用红花黄色素可降低CHO、LDL-C（P＜0.01,P＜0.05）;低剂量组小鼠肝脏组织中SOD、GSH-px含量显著升高（P＜0.05）,MDA含量显著降低（P＜0.05）,肝组织病理HE染色表明,注射用红花黄色素能够减轻肝组织细胞脂肪变性。2.注射用红花黄色素治疗高脂血症的网络药理学研究:研究发现羟基红花黄色素A和高脂血症共同靶点有52个。对GO和KEGG富集分析发现,注射用红花黄色素治疗高脂血症的关键靶点富集在PPAR、甲状腺激素、流体剪切应力和动脉粥样硬化等信号通路。3.注射用红花黄色素对高脂血症模型小鼠脂质合成和代谢的研究发现:其能够抑制HM G-C o A还原酶活性,LCAT、CYP 7A1、PPARγ均上升（P＜0.05）;对LPL、HL含量无明显变化。WB结果显示:模型组PP ARγ、LXRα、ABC A1、CYP7A1蛋白表达明显下降（P＜0.05）,各给药组PP ARγ、LXRα、AB CA1、CYP7A1蛋白表达明显升高（P＜0.05）。结论:1.注射用红花黄色素对脂乳剂诱导的高脂血症小鼠具有降血脂作用,能够减轻氧化应激反应及脂质过氧化损伤,抑制肝脏细胞内脂肪积累。2.采用网络药理学方法分析得出注射用红花黄色素可通过多个靶点、多种作用机制治疗高脂血症,其降脂机制可能与PPAR信号、甲状腺激素、流体剪切应力和动脉粥样硬化等通路有关。3.注射用红花黄色素可激活PPARγ-LXRα-ABC A1/C YP 7A1信号通路,促进胆固醇代谢,调节脂质紊乱。
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