治疗药物监测是个体化治疗的主要手段。随着个体化治疗的开展,临床药学工作者需要对大量的临床样本与越来越多的药物进行血药浓度监测,因此分析方法的耐用性、可靠性就是分析工作者必须要面对的问题。血药浓度监测常用的样品前处理方法有蛋白沉淀法（PPT）、液液萃取法（LLE）和固相萃取法（SPE）,但是这些方法往往需要多步操作,复杂的操作步骤会增加测量结果误差。对于一些细胞毒性药物的监测,复杂的操作步骤增加分析工作者与临床样本的接触机会,存在一定的安全隐患。因此,简化样品前处理的操作步骤,对于减少样品暴露机会,提高分析结果的准确性具有重要的意义。现有的样品前处理方法（PPT、LLE、SPE）操作步骤比较繁琐,中空纤维离心超滤（HFCF-UF）操作简单,仅需一步离心即可完成样品前处理,并且可以制备成半封闭的装置,减少样品的暴露。我们利用HFCF-UF技术,为临床血药浓度监测提供一个简便、快速的样品前处理方法。游离药物浓度分析中膜分离方法（平衡透析法、超滤法）是常用的样品前处理方法,但是膜对药物的非特异性吸附（NSB）是限制其应用的一个重要因素。当药物与膜产生严重的NSB时,会影响测定结果的准确性与可靠性,就限制了这些方法的使用。膜的NSB问题是样品前处理过程中的一个关键问题,因此我们研究减少膜对药物吸附的方法,通过采用吐温-80对中空纤维超滤膜进行改性,解决了膜对霉酚酸（MPA）的NSB问题。建立了中空纤维离心超滤（HFCF-UF）HPLC-MS/MS法用于MPA游离药物浓度监测。第一部分改性中空纤维离心超滤用于游离霉酚酸血药浓度监测目的:研究减少药物与中空纤维超滤膜非特异性吸附的处理方法,建立霉酚酸游离血药浓度测定的方法。方法:采用三种类型（阴离子、阳离子、非离子）的表面活性剂对聚砜（PSF）中空纤维超滤膜改性,并对表面活性剂的浓度和浸泡时间进行优化,以绝对回收率用作指标,考察各种类型表面活性剂对NSB的改善情况。结果:通过将聚砜中空纤维超滤膜浸泡在浓度为0.05 g/m L的非离子型表面活性剂Tween-80中3小时,MPA的绝对回收率接近100%,在此基础上建立了HPLC-MS/MS方法用于游离MPA血药浓度监测,其线性范围为10.12-506.0 ng/m L,定量限和检测限分别为10.12、3.04 ng/m L,日内、日间精密度的RSD值均小于8.9%,绝对回收率为99.2-107.6%。结论:本研究采用吐温-80改性的聚砜中空纤维超滤膜处理血样,解决了聚砜超滤膜与MPA的NSB问题,为临床简单快速分析MPA游离血药浓度提供了新的方法。第二部分简单快速的甲氨蝶呤血药浓度分析方法目的:建立简单、快速的甲氨蝶呤血药浓度分析方法。并将所建立的方法与传统方法进行比较,用来确定方法的可靠性。方法:取500μL血浆样品加入中空纤维离心超滤装置,加入20μL 5%三氯乙酸后涡旋混合,在离心转速3500 r/min条件下离心15min,10μL超滤液进行色谱分析。并将所建立的方法用于临床样本的测定,测量结果与传统方法进行比较。结果:加入蛋白沉淀剂（20μL 5%三氯乙酸）后一步离心操作完成样品前处理。其绝对回收率接近100%,直接采用对照品溶液建立的校准曲线与加标血浆样本所得校准曲线进行t检验,结果不存在统计学差异（P>0.05）。在此基础上建立了HFCF-UF方法用于MTX血药浓度测定。24例患者的MTX血药浓度测得结果与传统方法比较不存在统计学差异。结论:与血浆结合的MTX仅需要加入释放剂后一步离心即可完成样品前处理,整个样品前处理过程简单快速,特别适合批量临床血样的测定。建立的方法可以直接采用对照品溶液代替加标血浆建立标准曲线,避免了由于临床患者与健康人血浆条件的差异造成的误差。因此,该方法特别适合于临床血药浓度监测。