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本文主要研究内容是从健康仔猪粪便中针对性的筛选出饲料添加益生芽孢杆菌菌株并进行相关鉴定,进行体外性能评价,以豆粕为主要发酵基质利用其进行固态发酵,优化发酵条件,从而制备以豆粕为载体的活菌菌剂。本文以新鲜健康仔猪粪便为样品,经过低pH、高浓度胆盐、抑菌性实验筛选及形态学、生理生化、分子生物学鉴定,筛选并命名出枯草芽孢杆菌2株(NCU901、NCU902)、地衣芽孢杆菌1株(NCU903)、短小芽孢杆菌1株(NCU904)。选取抑菌性能最好菌株枯草芽孢杆菌NCU901进行后续实验研究。为确定枯草芽孢杆菌NCU901各生长时期,对NCU901进行为期120 h的生长曲线绘制,得出NCU901延滞期时间较短为0~2 h,指数期为2~20 h,后20~120h其存活率维持在较稳定范围内。耐热性实验表明,在40°C、60°C、80°C、100°C条件下分别处理不同时间,NCU901的死亡率都呈现起初短时间较高后降低的趋势;不同温度条件下处理20 min后,40°C条件下存活率几乎不受影响,60°C处理时存活率维持在52.75%,80°C存活率为33.46%,100°C存活率为24.42%。抑菌实验表明,NCU901对G+与G-致病菌均有较强的抑制作用。NCU901的16h无菌发酵液的抑菌性能最好,其中对G+致病菌中的金黄色葡萄球菌26003的抑菌作用最强,抑菌圈达到21.5 mm,对G-致病菌中的阪崎肠杆菌CMCC45401的抑菌作用最强。胃肠道耐受性实验显示,pH 3.0对NCU901未有明显影响,在pH 2.0条件下处理5 h后,存活率为81.75%;在胆盐质量浓度为0.1%时NCU901存活率未受到影响,胆盐浓度为0.5%处理5 h时,存活率为73.29%;体外胃肠液耐受性实验得出胃液处理4 h后,活菌数有所提升,后经过8 h肠液耐受性实验,NCU901存活率较转入胃液初存活率达到50.8%,较转入肠液初存活率达到68.59%,活菌浓度为8.85 Lg(CFU/mL),NCU901能够较好的耐受胃肠液的杀菌作用。以活菌数为指标,利用NCU901进行发酵豆粕实验研究。通过对单因素实验、正交实验及验证实验研究,结合发酵基质的粘稠度及后续干燥工艺考虑,选取发酵条件为:发酵时间36 h、发酵温度37°C、接种量6%、料液比1:0.8。烘箱干燥温度由40°C升高到50°C,活菌数由10.62 Lg(CFU/g)降至10.45Lg(CFU/g),但活菌数仍维持在较高水平;干燥温度为60°C时,活菌数下降明显,至9.76 Lg(CFU/g);70°C干燥粉碎后活菌数为9.26 Lg(CFU/g)。真空干燥条件下,40°C~60°C温度范围内,随温度升高,活菌数缓慢下降,60°C条件下活菌数仍维持较高水平为10.12 Lg(CFU/g);此后随温度升高,活菌数下降较快。综合考虑成本及能量损耗,选择低成本、较方便的烘箱进行干燥,干燥温度选择40°C。在为期6个月的保质期保存研究中,其活菌数维持在9.93 Lg(CFU/g)左右,仍能保持较高水平。