【摘 要】
：
呼吸机相关性肺炎（VAP）是患者在通过气管插管（ETT）或气管切开插管进行机械通气48小时后发生的医院获得性肺炎。VAP在重症监护室高发,导致严重并发症,是威胁重症患者生命的重要因素。因此,发展具有抑菌能力的机械通气管路对于VAP的预防具有重要意义。本研究基于溶菌酶的抗菌特性,将其应用于抑菌功能表面的构建,抑制呼吸机管路材料上生物膜形成。具体研究思路是基于呼吸机的常用管路材料——316 L不锈钢和
论文部分内容阅读
呼吸机相关性肺炎（VAP）是患者在通过气管插管（ETT）或气管切开插管进行机械通气48小时后发生的医院获得性肺炎。VAP在重症监护室高发,导致严重并发症,是威胁重症患者生命的重要因素。因此,发展具有抑菌能力的机械通气管路对于VAP的预防具有重要意义。本研究基于溶菌酶的抗菌特性,将其应用于抑菌功能表面的构建,抑制呼吸机管路材料上生物膜形成。具体研究思路是基于呼吸机的常用管路材料——316 L不锈钢和聚乙烯,提出并建立了一种先富集、后光交联偶联溶菌酶的不锈钢表面蛋白质固载策略,和一种先等离子体活化、后吸附溶菌酶的聚乙烯表面蛋白质固载策略,二者抗菌效果显著且可抑制生物膜生成,具体结论如下:（1）通过富集-光交联的两步法固载策略成功的将溶菌酶偶联在酪氨酸功能界面上,较优的反应条件为:p H为6.5;溶菌酶:APS:钌催化剂=40:20:1;光交联反应5 min。通过接触角分析、表面Zeta电位、FITC标记溶菌酶的荧光和元素分析进一步证明功能化表面构建符合预期。功能化不锈钢表面对金黄色葡萄球菌的抑菌率可达99.2%。通过活死菌染色和电镜对材料表面细菌数观察证明了功能化表面抗菌效果显著。利用大肠杆菌验证了功能界面抗菌活性的持久性。结果表明常温下放置50天后,仍具有70%以上的抑菌率。（2）通过氧等离子体处理聚乙烯表面,成功实现了材料表面的羧基活化,可通过静电作用有效吸附溶菌酶。等离子体处理时间为180 s时,对大肠杆菌的抑菌率最高可达到96.9%。接触角分析、红外光谱分析、FITC标记溶菌酶的荧光、表面形貌分析和元素分析进一步证明功能性表面构建符合预期。通过sulfo-SDTB的高灵敏度比色测定法测定功能化聚乙烯表面溶菌酶修饰密度最高可达0.32 nmol/cm~2。研究表明该体系具有持久的抗菌活性并能在早期延迟生物膜定植,对于生物膜形成具有明显的抑制作用。本研究建立的基于光交联和等离子体处理的技术策略均具有易于操作、简单快捷的特点,能够对呼吸机管路组件进行快速溶菌酶修饰,有望提高其使用过程中的抑菌效果,在VAP防治方面具有潜在应用价值。
其他文献
自噬的机制在进化上是极其保守的,同时也是一个精确协调的过程。在癌症中,自噬通过抑制肿瘤起始但支持肿瘤进展中扮演着两面性的角色——一方面,在某些不利的环境条件中,自噬机制可以显著增强某些癌症细胞的对环境应激因素的生物耐受能力,包括抵抗致癌瘤环境的胁迫反应和接受抗肿瘤的药物治疗,保护细胞其正常存活。另一方面,在人类癌症细胞发展的各个阶段,自噬也同样可以有效控制缺陷癌症细胞凋亡,甚至直接诱发凋亡导致缺陷
糖尿病是当今世界健康的第一大杀手。目前,糖尿病治疗多采用联合用药,但能同时调节多靶点的单一药物比联合用药效果要好,或将成为治疗糖尿病的新趋势。中国的饮食结构特征是以碳水化合物为主,这导致了中国糖尿病患者普遍具有餐后高血糖。因此,治疗糖尿病的关键是降低餐后高血糖以及预防和减少因长期高血糖引起的多种致死致残并发症的产生。治疗糖尿病的关键靶点是α-葡萄糖苷酶和醛糖还原酶。紫檀芪,是一种广泛存在于蓝莓、葡
阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）是一种与年龄相关神经退行性疾病。随着我国进入老龄化社会,其发病率与人数逐年增加,为社会和家庭带来了巨大的压力。但目前的药物只能延缓AD的病理过程,无法实现最终的治愈,主要原因是AD的发病机制尚不明确。AD最主要病理特征为老年斑,由β-淀粉样蛋白（β-amyloid protein,Aβ）组成。Aβ是公认的AD早期的生物标记物。现有研究认为
由小麦条锈菌（Puccinia striiformis f.sp.Tritici）引起的条锈病是一种严重的作物病害,制约着世界范围内小麦的生产。国内外大量的研究成果和生产实践证明,合理利用抗条锈病的小麦品种是防治条锈病最安全、有效的方法。条锈病无毒基因的鉴定对持久有效的防治条锈病至关重要。但小麦基因组庞大,对其抗性基因功能的研究进展缓慢,且有关小麦与条锈菌相关无毒基因的互作机理研究甚少。因此本研究
柞蚕是我国一种重要的经济昆虫,但在从幼虫到成虫的四个阶段很容易受到病原微生物的感染,对柞蚕产业造成了巨大的经济损失,因此,研究其病害防治在蚕业经济里尤为重要。柞蚕依赖天然免疫系统抵御外源微生物的入侵,其中模式识别受体对于昆虫体液免疫至关重要,他们能够识别病原模式相关分子,即细菌表面的脂多糖、肽聚糖等。两者之间的相互作用能启动宿主防御机制,从而保护柞蚕自身免受病原微生物的侵害。Malectin是一种
昆虫作为无脊椎动物,不具备脊椎动物的补体活化途径,其免疫系统也不存在T细胞和B细胞。随着对昆虫免疫机制研究的深入,发现先天免疫系统是昆虫抵御病原微生物的主要手段。昆虫的先天免疫系统主要依赖其体内的模式识别受体（pattern-recognition receptors,PRRs）与病原微生物相关模式分子（pathogen-associated molecular patterns,PAMPs）的识
腈水合酶（NHase）是一种能将氰基转化为酰胺基的金属酶,它以反应条件温和、专一性强和环境友好等优点已经用于工业规模催化生产精细化学品。但是天然NHase仍然存在底物亲和力低和热稳定性差等不足,因此需要对酶进行适当改造。定向进化技术的发展极大促进了人工改造酶催化性能的进程。半理性设计策略作为定向进化的一种,将酶的结构和功能信息与高通量筛选方法相结合大大减少了酶改造的工作量并提高了改造效率。使用半理
乳腺癌、肝癌等恶性肿瘤疾病严重影响人类健康,并显著缩短人们的寿命。传统的治疗方法包括手术切除、放疗和化疗。其中,手术切除治疗创面大,恢复慢,肿瘤易转移和复发。放疗和化疗期间,患者需要承受恶心、腹痛等不良反应引起的疼痛。同时,化疗药物的靶向性较低,不仅会杀死肿瘤细胞,还会毒害人体的正常组织。因此,我们应进一步开发新的安全有效的载体,不仅能有效杀死肿瘤细胞,还能保护其他正常组织免受损伤。对于恶性肿瘤这
钾是一种重要的营养物质,它能保持植物的正常生长发育和新陈代谢。玉米是我国产量最高的农作物,严重缺钾会导致品质和产量的下降。我国大部分耕地土壤的钾素含量不足,另外国内钾肥自给率不足,需大量倚靠钾肥进口。培育钾营养高效的转基因玉米新品种是解决此问题的有效途径。钾转运蛋白是植物吸收钾离子的主要途径,过表达钾转运蛋白基因可提高植物对钾离子的吸收能力。实验室前期从獐茅中克隆获得了Al HAK1,酵母功能互补
心血管疾病是当今社会威胁全人类生命健康的严重疾病之一。治疗心血管疾病的关键工具和重要因素是获得正常生理功能的心肌细胞。而目前人类多能干细胞（human pluripotent stem cells,hPSC）衍生的心肌细胞在产生符合治疗和研究心血管疾病的细胞模型方面具有巨大的优势。hPSC向心肌细胞诱导分化的分子机制中发现,Wnt信号、骨形态发生蛋白（bone morphogenetic prot