目的作为“基因组的守护者”,人体内重要的肿瘤抑制因子p53对正常细胞生长和肿瘤预防都至关重要。正常情况下,它参与体内DNA修复、细胞周期阻滞、凋亡、自噬、翻译和代谢等多种细胞途径,从而发挥抗肿瘤作用。但是,大量基因组测序结果表明,约半数以上的恶性肿瘤均存在p53突变,大部分是DNA结合域（DNA-binding domain,DBD）的错义突变。突变型p53不仅丧失了野生型p53（wild-type p53,WT-p53）的抑癌作用,还获得了一系列类似癌基因特性的功能,称为功能增益（gain of functions,GOFs）。其中p53-R280K突变虽然不是热点突变,但在多种肿瘤中广泛存在,与肿瘤的发生发展密切相关。代谢重编程是肿瘤新的“十大特征”之一,肿瘤代谢的研究主要集中于葡萄糖和谷氨酰胺代谢,近年来脂代谢重编程作为肿瘤的特征正逐渐被大家接受。然而突变体p53-R280K是否通过脂肪酸代谢通路调节肿瘤进展尚不清楚。通过筛选与脂肪酸代谢相关的靶基因,我们发现,MDA-MB-231中稳定敲低突变体p53-R280K后,脂肪酸合成酶（fatty acid synthase,FASN）的表达明显降低。因此,本研究的目的是探讨突变体p53-R280K是否通过直接上调FASN介导的脂肪合成促进肿瘤的进展。方法本研究采用CRISPR/Cas Rx技术敲低MDA-MB-231（p53-R280K）和ZR75-1（WT-p53）细胞中的p53表达;采用油红染色、流式细胞分析、以及甘油三酯和胆固醇试剂盒检测乳腺癌细胞中脂肪含量;通过染色质免疫共沉淀和荧光素酶实验确定p53对FASN的转录调节;通过CCK8、划痕和Transwell实验,检测突变体p53-R280K对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。建立裸鼠皮下成瘤和肺转移模型,观察突变体p53-R280K对肿瘤生长转移的影响。结果CRISPR/Cas Rx技术显著敲低了MDA-MB-231（mutant p53-R280K）和ZR75-1（WT-p53）细胞中p53的表达。突变体p53-R280K明显提高了乳腺癌细胞中FASN介导的脂肪合成。通过与FASN启动子结合,突变体p53-R280K促进了FASN的转录活性和表达。突变体p53-R280K通过上调FASN的表达促进体外乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,促进裸鼠体内肿瘤的生长和转移。结论1.突变体p53-R280K通过上调FASN介导的脂肪合成促进肿瘤进展,野生型p53则抑制FASN介导的脂肪合成和肿瘤进展。2.靶向突变体p53-R280K/FASN通路可能为携带突变体p53-R280K的肿瘤治疗提供新的策略。3.CRISPR/Cas Rx可以精准、有效地敲除p53在MDA-MB-231（mutant p53-R280K）和ZR75-1（WT-p53）细胞中的表达,CRISPR/Cas Rx可以作为肿瘤治疗潜在的有力工具。