目的:基于体内外实验研究,探讨黄连素对于肥胖诱发外周组织胰岛素抵抗的治疗作用及其机制,并进一步深入探索黄连素通过抑制脂肪细胞mi R27a释放缓解肥胖诱发外周胰岛素抵抗的分子机制,为其应用于糖尿病早期临床治疗提供理论支撑。研究方法:1.体内实验:用C57BL/6J小鼠,高脂喂养12w,以构建肥胖胰岛素抵抗模型;分为低脂组（LF）,高脂组（HF）及高脂联合黄连素干预组（HF+BBR,160mg/kg,灌胃给药4w）;检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌和脂肪组织分布情况,检测血清中mi R27a,葡萄糖,胰岛素,及甘油三脂水平,检测胰岛组织形态及胰岛素分泌情况,检测脂肪、骨骼肌、肝脏、胰岛、大脑海马回、心脏、肾脏组织中mi R27a水平;检测骨骼肌胰岛素信号通路关键蛋白表达水平（IRS1/AKT/GLUT4）;检测胰岛组织胰岛素分泌信号通路关键蛋白表达水平（Fox O1/PDX1/GLUT2/GPR40）。2.体外实验:采用3T3-L1脂肪细胞,给予棕榈酸刺激,模拟在体肥胖模型,分为对照组、模型组和黄连素干预组,油红O染色观察脂滴形态变化,检测细胞甘油三酯及上清mi R27a水平;采用肥大脂肪细胞,联合黄连素干预（10μM）与C2C12骨骼肌细胞共培养,检测骨骼肌细胞胰岛素信号通路关键蛋白表达水平（IRS1/AKT/GLUT4）;采用肥大脂肪细胞,联合黄连素干预（10μM）与MIN6胰岛β细胞共培养,检测MIN6胰岛β细胞胰岛素分泌信号通路关键蛋白表达水平（Fox O1/PDX1/GLUT2/GPR40）。研究结果:1.黄连素对肥胖诱发胰岛素抵抗模型小鼠治疗作用给予肥胖胰岛素抵抗模型小鼠黄连素治疗后,与HF组比较,黄连素显著降低小鼠血清葡萄糖,及甘油三酯水平,同时,与HF组比较,小鼠体脂分布显著下降。小鼠葡萄糖刺激的胰岛素分泌实验结果显示,黄连素可以明显增加胰岛素敏感性。胰岛组织HE染色与胰岛素免疫组织化学染色结果显示,与HF组比较,黄连素显著改善胰岛形态及胰岛素分泌功能紊乱。2.黄连素通过抑制脂肪细胞分泌mi R27a改善肥胖诱发外周胰岛素抵抗的分子作用机制体内实验:与LF组比较,HF组血清、骨骼肌、肝脏、胰岛、mi R27a水平显著升高,脂肪组织mi R27a水平显著降低;与HF组比较,在给予黄连素干预后,血清,骨骼肌,肝脏,胰岛,mi R27a水平显著降低。检测各组动物骨骼肌胰岛素信号通路蛋白GLUT4、p AKT/AKT及p IRS1/IRS1表达情况;结果显示,与LF组比较,HF组GLUT4、p AKT/AKT及p IRS1/IRS1蛋白表达显著降低,与HF组比较,给予黄连素干预后GLUT4、p AKT/AKT及p IRS1/IRS1蛋白表达水平显著升高。检测各组动物胰岛组织胰岛素分泌信号通路关键蛋白Fox O1、PDX1、GLUT2及GPR40表达情况;结果显示,与LF组比较,HF组Fox O1蛋白表达水平显著降低,PDX1、GLUT2及GPR40蛋白表达水平显著升高,与HF组比较,给予黄连素干预后Fox O1蛋白表达水平显著升高,PDX1、GLUT2及GPR40蛋白表达水平显著降低。体外实验:采用3T3-L1细胞,给予棕榈酸刺激并联合黄连素干预,结果显示,棕榈酸刺激的肥大脂肪细胞脂滴含量、甘油三脂及上清分泌的mi R27a水平显著增加,在给予黄连素干预后,肥大脂肪细胞脂滴含量、甘油三脂及上清分泌的mi R27a水平显著降低,表明黄连素抑制了肥大脂肪细胞mi R27a的分泌。将肥大脂肪细胞在有或无黄连素干预的状态下与骨骼肌细胞C2C12共培养,检测骨骼肌细胞胰岛素信号通路蛋白GLUT4、p AKT/AKT及p IRS1/IRS1表达情况;结果与体内实验相一致,肥大脂肪细胞共培养显著降低骨骼肌细胞GLUT4、p AKT/AKT及p IRS1/IRS1蛋白表达水平,再给予黄连素干预后,以上蛋白表达水平均显著升高。将肥大脂肪细胞在有或无黄连素干预的状态下与胰岛细胞MIN6共培养,检测胰岛细胞胰岛素分泌信号通路关键蛋白Fox O1、PDX1、GLUT2及GPR40表达情况;结果与体内实验相一致,肥大脂肪细胞共培养显著降低Fox O1蛋白表达水平,而PDX1、GLUT2及GPR40蛋白表达水平则显著升高,给予黄连素干预后,Fox O1蛋白表达水平升高,GLUT2及GPR40蛋白表达水平则显著降低,PDX1表达水平无显著性差异。结论:本研究证明了黄连素在肥胖诱发外周胰岛素抵抗中的重要作用,并进一步揭示了黄连素可能通过抑制脂肪细胞释放mi R27a,一方面调控骨骼肌胰岛素信号通路相关蛋白表达,改善骨骼肌胰岛素抵抗状态,另一方面调控胰岛组织胰岛素分泌相关蛋白表达,改善胰岛素分泌紊乱的分子作用机制,为黄连素在糖尿病的早期治疗提供理论依据。