miR455对外源性硫化氢干预在烧伤血清损伤的表皮细胞Caspase-12与CRT表达的影响

来源 :青海大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:song0719
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目的:研究miR-455是否参与硫化氢调控ERS介导的细胞凋亡。方法:将复苏后的表皮细胞作为研究对象,传代培养至第3代,随机分为3组:miR-455模拟剂组、miR-455阴性片段组、miR-455拮抗剂组,接种到6孔板上,继续培养1天后,各组分别用转染试剂将miR-455模拟剂、miR-455阴性片段、miR-455拮抗剂3种miRNA功能试剂转入表皮细胞内,转染24小时后,荧光显微镜下观察转染效率后,分别加入含10%烧伤血清的培养液培养4h,再分别用含150μmol/L NaHS的完全培养液培养16小时,取各组细胞总RNA及总蛋白后采用qPCR、Western blot检测各组的Caspase-12、CRT的mRNA及蛋白的表达水平。结果:1.miR-455功能试剂转染细胞后,模拟剂组细胞内miR-455表达被调高,与阴性片段组比较,差异有统计学意义;各组细胞内CRTmRNA表达水平降低,差异有统计学意义;2.在烧伤血清损伤后硫氢化钠干预,各组细胞内Caspase-12、CRTmRNA及蛋白表达水平比较,P<0.05,差异有统计学意义。结论:1.外源性硫化氢干预下,烧伤大鼠血清损伤的大鼠表皮细胞内Caspase-12及其mRNA的表达水平与miR-455的表达水平成正比,间接反映了miR-455表达水平降低,可以降低烧伤后大鼠表皮细胞内质网应激水平。2.miR-455的表达水平在外源性硫化氢保护烧伤后大鼠表皮细胞的过中起着重要作用。
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