背景:乳腺癌目前已成为我国女性最常见的恶性肿瘤,治疗方法主要包括:手术切除,化疗,内分泌治疗,放疗及靶向治疗。尽管如此,乳腺癌因耐药导致的复发及转移机率仍较高。因此,新的治疗策略仍待开发。2012年发现的铁死亡是一种细胞程序性死亡的新方式,其特征为铁离子依赖性的脂质过氧化。有研究报道小分子化合物erastin可以诱导部分肿瘤细胞发生铁死亡发挥抗肿瘤作用,然而近期有研究发现自噬在铁死亡过程中起着重要的调控作用。目前关于铁死亡与自噬间的关系尚不明确,因此我们研究erastin能否诱导乳腺癌细胞发生自噬及其作用机制,为其临床应用提供理论基础。目的:明确erastin能否引起乳腺癌细胞自噬性死亡并探讨其作用机制。研究方法:1、MTT法检测erastin对乳腺癌MCF-7及MDA-MB-231细胞增殖抑制率,LDH释放试验检测erastin对乳腺癌细胞的毒性作用及合加抑制剂后的杀伤情况。2、铁离子检测:通过铁离子比色法测定erastin作用于乳腺癌细胞后铁离子浓度的变化;检测DFO预处理1h后erastin诱导的乳腺癌细胞内铁离子含量的变化。3、Western Blot检测erastin时间梯度样品以及erastin合加抑制剂样品的自噬相关蛋白含量的变化。4、光镜下观察DFO提前1h预处理后,erastin作用于乳腺癌细胞MCF-7及MDA-MB-231的形态学特征。5、通过si RNA技术检测沉默ATG5基因后,erastin诱导细胞死亡率变化以及细胞内部蛋白含量的变化。研究结果:1、Erastin能够抑制乳腺癌细胞的存活并诱导其死亡,且该作用可被3MA、Baf-A1逆转。2、Erastin诱导细胞内铁离子水平升高并且升高水平与作用剂量和时间呈正相关,DFO可以抑制erastin诱导的铁离子水平的升高并抑制乳腺癌细胞死亡。3、Erastin作用于乳腺癌细胞可以上调自噬相关蛋白的表达水平,并且该上调作用可被自噬抑制剂3MA、Baf-A1和铁离子清除剂DFO所抑制。4、通过si RNA技术检测沉默ATG5基因后,erastin诱导的乳腺癌细胞死亡数量减少,并且抑制erastin诱导的自噬相关蛋白的上调。结论:1、Erastin抑制乳腺癌细胞MCF-7及MDA-MB-231的增殖并诱导细胞死亡。2、Erastin作用于乳腺癌细胞时可以上调细胞内铁离子含量。3、Erastin诱导乳腺癌细胞发生自噬。4、抑制erastin诱导的的细胞内铁离子水平的升高,可抑制erastin作用于乳腺癌细胞时引起的自噬。