背景和目的:食管癌是发病率和病死率都很高的消化系统恶性肿瘤,在组织学上分为鳞状细胞癌、腺癌和其他亚型。食管癌的发病率存在地域和文化差异,在一些亚洲国家尤其是我国,食管鳞状细胞癌的发病率很高。手术切除是治疗食管癌最有效的方法,但食管癌早期梗阻症状不明显,大多数患者出现梗阻症状即被诊断为晚期,多数病例已伴有淋巴结转移,转移性食管癌患者的预后极差。全身化疗在晚期食管鳞癌的治疗中起着至关重要的作用,可以缓解症状并延长生存时间。顺铂和5-氟尿嘧啶联合应用在晚期食管癌患者的全身化疗中显示出较好的疗效,5-氟尿嘧啶作为一种基础的化疗药物,被广泛用于治疗各种癌症,包括胃肠癌、乳腺癌和食管癌。5-氟尿嘧啶通过其代谢产物FdUMP抑制胸苷酸合成酶,干扰DNA合成。5-氟尿嘧啶单独使用或与其他化疗药物联合使用,可以降低肿瘤复发率,提高患者的无进展生存率和总生存率。然而,由于5-氟尿嘧啶耐药的发生,限制了 5-氟尿嘧啶的临床应用。5-氟尿嘧啶耐药是一种多因素事件,涉及酶代谢异常、转运紊乱、细胞周期紊乱、细胞凋亡抵抗和错配修复缺陷。尽管生物研究技术在过去几十年中取得了进步,但5-氟尿嘧啶耐药的分子机制尚未完全阐明。近年来CircPVT1作为最有效的致癌非编码RNA而备受关注,CircPVT1是一种由长非编码RNA（LncRNA）PVT1第二外显子环化而来的环状RNA,位于染色体8q24上。大量研究显示,CircPVT1的过表达与多种致癌因素相关,如过度增殖、侵袭、血管生成和耐药有关。CircPVT1在多种类型的肿瘤中明显上调,在肿瘤发生发展过程中起致癌非编码RNA的作用,CircPVT1可以促进多种癌症的增殖、转移和化疗耐药,包括胃癌、头颈部鳞状细胞癌、骨肉瘤、急性淋巴细胞性白血病、肝癌、非小细胞肺癌等。本研究中我们通过检测耐药食管癌细胞中CircPVT1的表达水平,验证CircPVT1在5-氟尿嘧啶耐药的食管癌细胞中的作用,为晚期食管癌的治疗提供新的理论依据。方法:1、诱导食管癌细胞对5-氟尿嘧啶（5-FU）产生耐药,RT-qPCR检测CircPVT1在食管癌细胞以及对5-FU耐药的食管癌细胞的表达水平。2、设计合成针对CircPVT1的shRNA,利用脂质体转染技术转染耐药的食管癌细胞（CircPVT1 shRNA）,敲低CircPVT1基因在耐药食管癌细胞中的表达量,同时转染shRNA NC作为阴性对照组。3、通过CCK-8实验、细胞毒性实验、Transwell小室侵袭实验、伤口愈合实验检测敲低CircPVT1基因对耐药食管癌细胞的影响。Western blot检测下游信号蛋白P-gp和MRP1的表达。4、裸鼠种瘤,比较瘤体体积和重量,检测Ki67蛋白和DNA损伤标志物gH2AX的表达水平。结果:1、CircPVT1在5-FU耐药的EC9706和KYSE70食管癌细胞中表达水平明显高于EC9706和KYSE70食管癌细胞。2、CircPVT1基因被敲减后,细胞活力受到抑制,并且随着CircPVT1基因的敲减,细胞侵袭能力降低,细胞毒作用增强。3、Western Blot分析结果表明,在EC9706/5-FU和KYSE70/5-FU细胞中,敲减CircPVT1可显著降低耐药蛋白P-gp和MRP1的表达。4、动物实验表明,敲减CircPVT1能抑制肿瘤生长,CircPVT1 shRNA联合5-FU效果最显著。结论:这项研究首次发现CircPVT1在5-Fu耐药的食管癌细胞中表达明显上调,敲减CircPVT1可以明显抑制食管癌细胞的增殖侵袭能力,CircPVT1可能成为诊断食管癌的潜在生物标志物。并且敲减CircPVT1可以增强食管癌细胞对5-氟尿嘧啶的化疗敏感性,为食管癌的治疗提供新的理论依据。