盐酸小檗碱及联合应用顺铂诱导宫颈癌细胞株凋亡的研究

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目的:研究不同浓度盐酸小檗碱单用及联合应用顺铂对人宫颈癌Hela细胞凋亡的影响,探讨其抗癌机制。 方法:将不同浓度的盐酸小檗碱、顺铂分别或联合作用于人宫颈癌Hela细胞,采用MTT 比色法检测细胞体外增殖的抑制作用;倒置显微镜下,HE 染色观察药物作用后细胞凋亡形态结构改变;原位末端标记法(TUNEL 法)检测细胞凋亡率;采用免疫组化SABC法检测 Hela 细胞中NF-kBp65和COX-2的表达。 结果:MTT 比色法表明,盐酸小檗碱能抑制宫颈癌 Hela 细胞的体外增殖(P<0.05),并在10.0μg/ml~40.0μg/ml浓度范围内和12~48小时内具有剂量、时间依赖性(P<0.05);倒置显微镜下,HE染色观察到细胞皱缩、核质浓缩、核碎裂,细胞起泡以及凋亡小体形成等凋亡特征性的形态学变化;TUNEL 法可检测到细胞内呈棕黄色颗粒的凋亡细胞,其凋亡率显示:盐酸小檗碱诱导宫颈癌Hela细胞凋亡表现出剂量和时间依赖性(P<0.05);免疫组化SABC法结果显示,盐酸小檗碱能引起细胞内NF-kBp65和COX-2 表达下调,与对照组相比差异有显著性(P<0.01);盐酸小檗碱与顺铂联合用药较各单药抑制Hela细胞生长的作用明显增强,表现出明显的协同作用,且高剂量的盐酸小檗碱可增加顺铂的疗效。 结论: 1、盐酸小檗碱对宫颈癌Hela细胞体外增殖具有明显的抑制作用 2、盐酸小檗碱能增强顺铂对宫颈癌 Hela 细胞的抑制作用并增加其诱导宫颈癌:Hela细胞的凋亡,其作用机制可能与降低NF-kBp65的表达有关。 3、盐酸小檗碱诱导Hela细胞凋亡与NF-kBp65和COX-2的表达下调有关,降低NF-kBp65 蛋白的活化可抑制COX-2蛋白的表达。
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