论文部分内容阅读
目的：探讨烟酸联合姜黄素对高脂血症大鼠的降脂作用以及相关机制，为合成新化合物姜黄素烟酸酯及其衍生物提供合理的实验依据。方法：依据正交设计法筛选目标组方及确定最佳配比。将110只大鼠随机分为11组，每组10只。A、正常对照组，B、高脂模型组，C、溶媒组，D、姜黄素低剂量组[100mg/kg/d]，E、姜黄素高剂量组[200mg/kg/d]，F、烟酸低剂量组[100mg/kg/d]，G、烟酸高剂量组[200mg/kg/d]，H、姜黄素低剂量+烟酸低剂量组[100mg/kg/d+100mg/kg/d]，I、姜黄素低剂量+烟酸高剂量组[100mg/kg/d+200mg/kg/d]，J、姜黄素高剂量+烟酸低剂量组[200mg/kg/d+100mg/kg/d]，K、姜黄素高剂量+烟酸高剂量组[200mg/kg/d+200mg/kg/d]。喂饲高脂饮食8周，每天观察大鼠毛色、精神、活动状况等。8周后检测大鼠血脂，处死、取其肝脏，HE染色，免疫组织化学检测肝脏TNF-α、IL-6的表达情况，RT-PCR检测肝脏SCAP、SREBP-2、LDLR的mRNA表达情况，Westernblot检测肝脏LDLR的蛋白表达情况。结果：正交设计法筛选目标组方，通过比较大鼠存活率，血脂检测及肝脏HE染色，确定目标组方最佳配比为姜黄素：烟酸=2:1。与正常对照组相比，高脂模型组的TC、LDL均明显升高，差异有显著性，而TG不升反降。与模型组相比，溶媒组对高脂血症大鼠的血脂基本上无影响，姜黄素低、高剂量组均能显著降低血浆TC、TG、LDL含量(p<0.01或p<0.05)，且SD大鼠没有死亡情况发生。烟酸低、高剂量组均能降低TG、LDL含量(p<0.05)，但大鼠死亡数较多，特别是烟酸高剂量组，大鼠的死亡数超过一半，证明了烟酸的确存在很大的副作用，毒性较高。姜黄素与烟酸联合用药组均能降低TC、TG、LDL含量(p<0.01或p<0.05)，且大鼠的死亡情况与烟酸组比较，得到了很好的改善，使烟酸的毒性降低了很多，其中以姜黄素与烟酸[200mg/kg/d+100mg/kg/d]联合用药组效果最佳。免疫组织化学检测大鼠肝脏TNF-α与IL-6的表达，我们发现，模型组切片上棕褐色或棕黄色着色的细胞数目比正常组显著增多；与模型组比较，姜黄素组、烟酸组与联合用药组切片上棕褐色或棕黄色着色的细胞显著减少，其中以联合用药组效果最佳。RT-PCR检测结果表明：联合用药与单独用药相比，上调SCAP、SREBP-2、LDLRmRNA的表达水平显著。Westernblot检测结果显示：联合用药与单独用药相比，有升高LDLR蛋白表达的趋势。结论：1.具有调节血脂代谢紊乱作用的目标组方最佳配比为姜黄素：烟酸=2:1；2.姜黄素与烟酸[200mg/kg/d+100mg/kg/d]联合用药可增强降脂作用，且较两者单独用药效果更佳；3.联合用药能够明显降低肝脏TNF-α、IL-6的表达；4.联合用药的降脂机制可能与SCAP-SREBP-2-LDLR信号通路有关。