目的:肝脏缺血再灌注损伤(IRI)是肝切除手术及肝移植术中常见的损伤,也是导致患者术后肝脏功能恢复缓慢和功能障碍的重要原因,此外,其诱发的免疫反应常引起远隔器官的损伤,从而影响术后各器官功能的恢复,甚至导致患者死亡。有研究表明树突状细胞(DCs)在肝脏IRI中起着重要作用。外泌体是在生理和病理条件下,树突状细胞,巨噬细胞,T细胞等多种细胞分泌的小双膜囊泡。但是,树突状细胞来源外泌体(DEXs)在肝脏IRI中的作用机制尚不明确。在本研究中,我们检测了缺血再灌注后DEXs的分泌情况,并进行了相关的功能实验,探究DEXs在调节小鼠肝脏IRI中的作用机制。方法:分离原代肝细胞并用于模拟肝脏缺血再灌注微环境。将提取的骨髓源性树突状细胞(BMDC)经不同刺激后提取外泌体,通过尾静脉将不同条件下分泌的外泌体在肝脏IR之前全身注射入小鼠,并评价治疗效果。通过酶联免疫吸附测定(ELISA),和病理分析分别检测血清转氨酶(天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)),炎症细胞因子和组织学变化。使用梯度超速离心分离DEXs,通过透射电子显微镜(TEM)和纳米追踪分析(NTA)和蛋白免疫印迹(WB)进行鉴定。然后我们将BMDCs/DEXs和Th0细胞同培养并诱导其向Treg/Th17细胞分化,再进行流式细胞仪(FCM),ELISA和共聚焦显像分析。最后,应用HSP70抑制剂cm HSP70.1,PI3K抑制剂BKM120和m TOR抑制剂雷帕霉素来研究DEXs来源HSP70影响Th0细胞分化及功能的信号机制。结果:H/R-BMDCs组中的调节性T细胞(Treg)明显高于其他组,而辅助性T细胞17(Th17)则低于其他组,但是抑制了DEXs的释放后,这种作用明显减弱。此外,共聚焦成像显示Th0细胞对H/R-DEXs的摄取大于对照组或阴性组,并且这种增加与Treg和Th17的分化密切相关。另外,H/R-DEXs给药改善IR后小鼠的肝功能。最后,HSP70,PI3K和m TOR的抑制则减弱了DEXs对Th0细胞的影响。结论:骨髓源性树突状细胞通过外泌体来调节Treg和Th17细胞之间的平衡,从而减轻肝脏缺血再灌注损伤。进一步,DEXs通过将HSP70转运至Th0细胞及刺激PI3K/m TOR轴以调节Treg和Th17细胞之间的平衡从而缓解肝脏缺血再灌注损伤。