第一部分Lnc RNA AF在结直肠癌发生发展中的作用及其机制研究长链非编码RNA(long non-coding RNA,Lnc RNA)在结直肠癌的发生发展中发挥重要作用。目的:筛选出结直肠癌相关Lnc RNA,观察研究其在结直肠癌中异常表达的临床意义,研究其对于结直肠癌细胞生物学功能的影响,探索其在结直肠癌中发挥生物学功能的分子机制,为结直肠癌的分子诊断和临床治疗寻找新的靶点并提供理论依据。方法:通过Lnc RNA芯片筛选出结直肠癌中差异表达的Lnc RNA,收集结直肠癌患者肿瘤组织新鲜标本,通过实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,q PCR)检测并验证目标Lnc RNA表达水平,分析其与结直肠癌患者临床病理学特征及预后的关系;通过敲低、过表达目标Lnc RNA,实行增殖、侵袭体外细胞功能实验及裸鼠皮下成瘤实验,研究目标Lnc RNA对于结直肠癌细胞生物学功能的影响,进而通过q PCR、Western Bolt、RNA Pull Down、CO-IP等实验研究目标Lnc RNA发挥生物学功能的靶蛋白及其作用机制。结果:Lnc RNA AF在结直肠癌组织中的表达量显著高于癌旁正常组织,且表达水平与结直肠癌患者的肿瘤大小、浸润深度以及总生存率密切相关,是影响结直肠癌患者预后的独立危险因素;体内体外实验发现AF可促进结直肠癌细胞的增殖;机制研究发现AF通过结合HSP90,促进其与MYC的结合,防止MYC的泛素化降解,从而调控MYC的表达,导致结直肠癌细胞的增殖。结论:AF有望成为结直肠癌辅助性诊断的分子指标物及患者预后的参考指标,其在结直肠癌的发生发展中发挥重要作用,有望作为结直肠癌分子靶向治疗的潜在靶点。第二部分TEAD4在结直肠癌发生发展中的作用及其机制研究已有研究表明,TEA结构域转录因子4(TEA domain transcription factor 4,TEAD4)在某些恶性肿瘤中发挥着重要的作用。目的:研究TEAD4在结直肠癌中异常表达的临床意义,研究其对于结直肠癌细胞生物学功能的影响,探索其在结直肠癌中发挥生物学功能的分子机制。方法:通过q PCR检测在结肠肿瘤组织和配对正常组织中TEAD4的表达水平,通过免疫组化研究TEAD4表达水平与结直肠癌患者临床病理特征的关系;利用敲低TEAD4进行增殖、侵袭的细胞功能实验,研究TEAD4对结直肠癌细胞生物学功能的影响;通过Western Bolt、Ch IP等实验研究TEAD4发挥生物学功能的靶蛋白及其作用机制。结果:TEAD4在结直肠癌组织中显著高表达,表达水平与结直肠癌患者的肿瘤大小、浸润深度以及总生存期显著相关;TEAD4可以促进结直肠癌细胞的增殖和侵袭能力;TEAD4可以激活Hippo通路相关基因的表达,在转录水平激活YAP1,促进结直肠肿瘤的发生发展。结论:TEAD4有望成为结直肠癌辅助性诊断的分子指标物及患者预后的参考指标,其在结直肠癌的发生发展中发挥重要作用,并有望作为结直肠癌分子靶向治疗的潜在靶点。