目的：探索并熟练掌握离体脑片培养技术；建立离体脑片的谷氨酸损伤模型；探讨丙泊酚预处理对乳鼠脑片谷氨酸损伤的保护作用。　　方法：取新生10-15天乳鼠皮层切成400UM厚度的脑片置于有微孔膜的培养皿内同时放入37℃,5％CO2、95%O2的标准培养箱保持脑片在气液界面上进行培养。脑片培养成功至第七天随机分为四组：A组（正常对照组），B组（谷氨酸损伤组），C组（10mg/l丙泊酚预处理组），D组（20mg/l丙泊酚预处理组）。C组和D组分别予以10mg/l、20mg/l丙泊酚预处理24h后B、C、D组予以1mmol/L谷氨酸损伤0.5h，所有分组换正常培养基继续培养24h后观察。观察指标为：脑片形态学观察；HE染色后脑片组织内细胞形态变化和透射电镜下细胞超微结构变化；TTC（2,3,5—氯化三苯基四氮唑)染色比色法测定各组脑片组织损伤率；乳酸脱氢酶（LDH）检测漏出率；使用免疫组织化学法检测星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达的变化。　　结果：1.显微镜下培养脑片逐渐变薄、细胞形态完整、存活良好；HE染色 A组脑片层次清楚，各层神经元数量多、密度大，胞内核大而圆呈蓝色，胞浆染色浅呈淡红色，部分可见明显核仁，神经元周围有许多圆形或椭圆形胶质细胞。B组脑片结构无A组丰富，神经元数量及密度明显减少，细胞空泡状，胞核固缩，部分细胞卷曲、皱缩变形，胶质细胞明显增多。C和D组细胞数量减少不明显，可见少量细胞胞浆呈深红色，核固缩。2.透射电镜下A组见神经元细胞核仁明显，核染色质均匀，核膜呈两暗一明、均质正常；细胞浆内各种细胞器丰富、正常，见大量散在核糖体，胞浆线粒体、粗面内质网结构完好。B组核染色质边集、核膜破裂，线粒体肿胀空化、嵴消失，粗面内质网溶解、消失。C和D组胞膜、核膜正常，胞浆内细胞器数量明显减少不如正常组丰富，核膜融合、裂隙增宽，细胞浆稀疏出现溶解现象，部分粗面内质网扩张见局灶溶解。3.乳酸脱氢酶（LDH）漏出率及皮层脑片TTC染色组织损伤率结果显示：C、D组与B组比较，差异有统计学意义；D组较C组培养液中LDH释放量及LDH释放率减少，二者间差异有统计学意义，D组较C组皮层脑片TTC染色吸光度值（A490）高,组织损伤率低,二者间差异有统计学意义。4.A组星形胶质细胞均匀分布，细胞核较小、呈圆形或卵圆形，细胞突起细长,GFAP阳性的星形胶质细胞表达少；B组星形胶质细胞胞体肥大、肿胀、突起增多,GFAP阳性的星形胶质细胞表达增加，阳性反应强；C、D组与B组相比GFAP阳性胶质细胞数量减少,阳性反应减弱,细胞形态有所恢复。　　结论：离体脑片培养成功，随着培养时间的延长脑片厚度变薄，镜下结构清晰；成功建立脑片谷氨酸损伤模型；丙泊酚预处理对乳鼠脑片的谷氨酸损伤有保护作用。