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目的:多种病理、生理条件均可导致肝脏的缺血再灌注损伤,对肝脏缺血再灌注损伤机制及防护研究,具有重要的临床及研究价值。一氧化氮(NO)是一种功能强大的血管舒张因子,具有多种功能。大量的研究表明,NO可能对肝脏缺血再灌注有重要的影响,但其具体作用尚不一致。本实验意在研究NO对肝脏缺血再灌注损伤的作用及其可能的机制。方法:雄性SD大鼠90只随机分为三组:左中肝叶先行缺血70min,后恢复血流,于复流前静脉给与生理盐水(损伤组),或复流前静脉给与L-精氨酸(处理组);假手术组只给与暴露左中肝叶之肝蒂。各组动物分别在复流后0hr、1hr、3hr、6hr、12hr取血液标本,血清标本用以检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和谷胱甘肽-S转移酶(GSH-ST)。血浆标本用以检测TNF-α浓度。再取再灌注6hr时的肝脏标本,应用DNA断端标记法(TUNEL法)进行凋亡细胞检测,并进行计数,同时进行电镜观察。另外,同样取再灌注6hr时的肝脏标本,进行免疫组化染色(SABC法),检测Bcl-2阳性表达细胞,并计数阳性细胞百分率。结果:损伤组血清ALT、在再灌注后明显升高,在再灌注1hr后与对照组比较有显 弟。车医大学研究生企文 著性差异(HO.05),表明模型的建立是成功的。血清 MDA、GSH卡T和“H干X 含量较假手术组有明显的提高(KO.05),而在复流后 3h血清 GSH水平明显 降低(HO.05)。给与卜精氨酸处理可以明显减轻这种变化(HO.05)。再灌 注 6 hr,损伤组肝脏组织标本中可以发现明显的 TUNEL阳性细胞,电镜观察 发现细胞凋亡的典型改变。L-精氨酸处理组,肝脏标本中TUNEL阳性细胞数 较损伤组明显减少(P(.05)。应用兔疫组化染色发现,处理组肝脏标本BC12 阳性细胞较损伤组增加,但各组间相比并无显著性差异。结论:L-精氨酸对 大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用可能与抑制自由基、TNF-a的损伤作用 有关,并且NO对自由基损伤的保护作用可能与上调还原型谷腕甘肽水平有 关。血清GSH-PT、GSH-ST活性受到肝细胞损伤后释放增加的影响,与肝脏 损伤程度有关。在本实验中还发现,应用卜精氨酸可以抑制肝脏缺血再灌注 后细胞凋亡的发生,这种效应是多机制共同作用的结果。