利用大豆黄浆水发酵生产谷胱甘肽的研究

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大豆黄浆水是豆制品加工过程产生的废水,含有大量乳清蛋白、大豆低聚糖等有机物。把大豆黄浆水直接当作废水排放,既造成环境的严重污染,又浪费了宝贵资源。对大豆黄浆水进行生物发酵,生产生物活性物质,这不仅减少了环境污染,使废水得到了有效地利用,而且还为谷胱甘肽的生产开辟了一条新途径。本文主要研究用大豆黄浆水发酵生产GSH,选育出高产GSH的酵母菌株及对其发酵条件进行了优化,并对GSH进行了分离纯化。首先,研究选择产朊假丝酵母、酿酒酵母、热带假丝酵母、卡尔斯酵母等四种酵母菌,比较其发酵大豆黄浆水生产GSH的产率,选择出GSH产率最高的菌株为产朊假丝酵母。以产朊假丝酵母作为出发菌株,在紫外诱变时间120s、抗性筛选培养基上ZnC12浓度2g/L条件下进行诱变,筛选出高产GSH菌株C1,GSH产率为13.4mg/g,提高了79.2%。连续5代培养证明C1菌株具有良好的遗传稳定性。为提高GSH产量,对高产GSH菌株C1进行了大豆黄浆水发酵条件研究,结果表明,在装液量为60%,发酵温度为32℃,接种量为6%,发酵时间为22h条件下,谷胱甘肽的产量达到最高,为21.5mg/L,提高了 36%。发酵前后大豆黄浆水中有机物质得到了降解,其中BOD5、COD分别降低了 54.9%、32.1%,但黄浆水仍未达到国家规定的废水排放的标准。最后用阳离子交换树脂(001 X7)分离纯化制备GSH,并对其纯化条件进行了优化,在上样液pH值为3.0,洗脱剂为3%HCl,洗脱流速为2mL/min条件下进行分离纯化,谷胱甘肽的平均回收率达到67.5%。经薄层层析检测产品GSH纯度较低,纯化方法有待进一步研究。
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