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血吸虫病（Schistosomiasis japonicum）是一种危害严重的由血吸虫（Schistosoma japonicum）感染引起的人畜共患的寄生虫病。在我国流行的是日本血吸虫病。近年来，我国血吸虫病防治工作已取得了举世瞩目的成就，但单靠药物不能控制血吸虫病的流行，且长期反复的药物治疗会引起血吸虫产生抗药性的危险，因此加强血吸虫病疫苗的研制开发及疫苗候选分子的筛选无疑是血吸虫病防治的重要手段。肌醇单磷酸酶(Inositol monophosphate)是磷脂酰肌醇信号传递途径中的一种重要的酶，在哺乳动物中，IM能够将胰岛素的脂质第二信使PI(3，4,5)P3水解成PI（3，4)P2。然而在寄生虫中IM基因的功能鲜有报道，探讨SjIM的生物学功能可为血吸虫疫苗候选分子的筛选提供了新思路。本研究利用生物信息学和分子生物学技术首次对日本血吸虫肌醇单磷酸酶的基因进行了克隆、表达、并对SjIM重组蛋白诱导的免疫保护效果进行了初步评估。一．日本血吸虫SjIM基因的克隆及在不同发育阶段虫体中mRNA的表达分析。通过BLAST分析比对，获得SjIM基因的全长cDNA序列，该基因核苷酸序列与日本血吸虫其他已知基因无显著同源性，为日本血吸虫的新基因，命名为SjIM。GenBank登录号为FN319326.1，开放阅读框为834bp，编码277个氨基酸，理论分子质量为30680.48Da。设计特异引物进行PCR扩增，克隆这个基因的全长cDNA。以看家基因Tublin为内参，应用荧光定量PCR技术分析了SjIM基因在日本血吸虫7d、14d、21d、28d、35d和42d雌雄虫体内的表达情况，结果显示，SjAIM在日本血吸虫童虫和成虫中均有表达，其中在35d虫体内表达量最高，且雌虫体内表达量高于雄虫。二．重组表达质粒SjIM-pET-28a的构建、表达及免疫保护效果的评估。成功构建了SjIM-pET-28a重组原核表达质粒，该重组蛋白在E.coli(DE3)中以包涵体形式表达，分子质量约为31kD，Western blotting结果分析表明该融合蛋白具有较好的抗原性。用纯化的SjIM-pET-28a重组蛋白免疫BALB/c小鼠，结果显示与空白对照组相比，SjIM-pET-28a重组蛋白在小鼠中分别诱导了48.76%减虫率和41.29%的肝脏减卵率，差异显著（p<0.05）。应用ELISA方法检测小鼠血清中特异性IgG抗体水平变化，结果表明SjIM-pET-28a重组蛋白免疫组小鼠在3次免疫后诱导产生了高水平的特异性IgG抗体，推测重组蛋白SjIM-pET-28a在小鼠中诱导产生的免疫保护效果可能与免疫小鼠血清中高滴度的IgG特异性抗体有关。三．真核质粒SjIM-pVAX1的构建和DNA疫苗的免疫保护效果评估成功构建了重组真核表达质粒SjIM-pVAX1，用重组真核质粒免疫BALB/c小鼠，结果显示与空白对照组相比，真核表达质粒SjIM-pVAX1在BALB/c小鼠中诱导了28.94%的减虫率和39.07%的肝脏减卵率,差异显著（p<0.05），重组pVAX1-SjIM免疫小鼠在3次免疫后诱导产生了高滴度的特异性IgG抗体。推测重组真核质粒SjIM-pVAX1在小鼠中诱导产生的免疫保护效果可能与免疫小鼠血清中高滴度的IgG特异性抗体有关。本文首次克隆和表达了日本血吸虫新基因SjIM。用重组表达蛋白SjIM-pET-28a和真核重组质粒SjIM-pVAX1免疫小鼠，均诱导了部分免疫保护效果。本文研究为深入探讨SjIM的生物学功能，筛选新的血吸虫病疫苗候选分子提供了基础。