小秦艽花化学成分及质量评价研究

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小秦艽(Gentiana dahurica Fisch.)为龙胆科(Gentianaceae)龙胆属药用植物,又名达乌里龙胆,达乌里秦艽。小秦艽的花,为特色蒙药,主要用于复方,具有清热解毒、止咳祛痰的功效,主治肺热咳嗽、咽喉热、咽喉肿痛、毒热、瘟热等。课题组前期对小秦艽花的化学成分进行了系统研究,揭示了其主要的有效成分类型为三萜类、黄酮类、酚酸类和环烯醚萜类化合物。因此,本文旨在延续前期工作的研究,继续小秦艽花的植化研究工作,进一步阐明其药效物质基础;在明确小秦艽花所含的活性成分以后,研究适合小秦艽花质量评价和质量控制的分析方法。应用现代色谱技术对小秦艽花进行了系统的化学成分研究,同时运用现代波谱技术(MS,1H-NMR,13C-NMR)进行结构鉴定。从小秦艽花中分离鉴定了8个化合物:1-羟基-3,7,8-三甲氧基酮(1),28-hydroxy-11-oxoolean-3-palmitate(2),龙胆酸(3),2-呋喃甲酸(4),苜蓿素(5),异香草酸(6),(3S)-1,2,3,4-Tetrahydro-β-carboline-3-carboxylic acid(7)和5-羟甲基-2-糠醛(8)。化合物18均为首次从本种植物中分离得到。本课题优化了小秦艽花中大类活性成分总三萜、总黄酮、总酚酸和总环烯醚萜的提取工艺,建立了其含量测定方法,结果表明10批次小秦艽花样品总三萜含量分别为24.9892.77 mg·g-1,总黄酮含量为5.9011.47 mg·g-1,总酚含量为9.5417.04mg/g,总环烯醚萜含量为67.95155.16 mg·g-1。四种含量测定方法操作简便,精密度、重现性良好,结果准确可靠,可用于评价小秦艽花的质量以及资源利用价值。本课题首次建立了HPLC法测定小秦艽花中5个活性成分含量的方法。以木犀草素-6-C-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-葡萄糖苷、马钱苷、芹菜素-6-C-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素-6-C-β-D-吡喃葡萄糖苷和芹菜素-6-C-β-D-吡喃葡萄糖苷为对照品,采用Symmetry?C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5.0μm),以乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,柱温35℃,检测波长为245 nm和330 nm。19批小秦艽花样品中木犀草素-6-C-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-葡萄糖苷、马钱苷、芹菜素-6-C-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素-6-C-β-D-吡喃葡萄糖苷和芹菜素-6-C-β-D-吡喃葡萄糖苷的含量范围分别为1.157.71 mg·g-1,0.269.23 mg·g-1,0.130.96 mg·g-1,0.927.46 mg·g-1,0.591.70 mg·g-1。研究所用的HPLC法操作简单,重现性好,分离度高,为小秦艽花质量评价提供科学的依据,为以后进行药理活性等相关试验提供科学的理论和物质基础。
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