论文部分内容阅读
目的:多囊卵巢综合征是一种以月经稀发、卵泡发育障碍、胰岛素抵抗和高雄激素为其特征性改变的病因复杂的神经内分泌疾病，其在育龄妇女的发生率约为5％-10％。由于患者异常的内分泌改变，常引起月经紊乱、肥胖、多毛及不孕等，并且在妊娠以后容易发生自然流产。有报道，PCOS患者在妊娠早期尤其是最初3个月内流产率高达25％-73％。早期流产是人类生殖中最常见的并发症，有报道在习惯性流产患者中PCOS的发生率高达58％。近年的研究结果提示，子宫内膜发育障碍和胚胎容受性障碍可能导致PCOS患者不良的妊娠结局和弱的生育能力。
环氧化酶属于膜结构蛋白，是前列腺素合成过程中的一种重要限速酶，哺乳动物体内有COX-1、COX-2、COX-3三种同工酶。COX-2在血管内皮细胞、神经细胞、巨噬细胞、纤维母细胞和软骨细胞等均有表达，其位于核内、内质网，在细胞外网状结构、核膜和细胞核边缘并发生相应作用，主要参与疼痛信号的传递、炎症过程及肿瘤的发生发展。在人类胚胎着床期间，COX-1、COX-2均有表达，COX-1主要在腺上皮和腔上皮表达，COX-2主要在血管周围细胞和腺上皮表达。用免疫组化和组织超微定位方法研究2-细胞期、4～8-细胞期、桑椹胚等不同发育阶段的胚胎，所有胚胎都显示COX呈阳性表现，其中2-细胞期表达最强。COX与胚泡着床关系密切，它受雌激素、孕激素等因素的调节，通过膜受体和核受体途径参与着床，在着床期呈高水平有规律表达。COX主要作用于子宫内膜，通过调节子宫内膜的腔上皮分化、问质蜕膜化、血管通透性等诸多方面而影响着床，其在着床过程中起着不可替代的重要作用。
表皮生长因子是1962年首次从小鼠颌下腺中分离出来的。它含有53个氨基酸，为单链多肽类生长因子，与表皮生长因子受体结合，通过表皮生长因子受体自身磷酸化而发挥其生物学作用。表皮生长因子具有促有丝分裂和非促有丝分裂得两重性，能刺激内中外胚层的细胞的增殖和分化，促进组织的生长，发育，成熟。表皮生长因子在卵泡发育，卵母细胞成熟、胚胎早期、胚胎着床期、子宫内膜蜕膜化的过程中均起重要作用。并且表皮生长因子对女性的内分泌腺有调节作用，可直接影响多种内分泌腺的分泌功能，可促进促性腺激素、促肾上腺皮质激素、绒促性素、泌乳素、促甲状腺激素等的分泌。
环氧化酶-2和表皮生长因子是与子宫内膜容受性相关的重要因子，本题研究子宫内膜环氧化酶-2、表皮生长因子在发生早期流产的多囊卵巢综合征患者的子宫内膜的表达情况，初步探讨子宫内膜中环氧化酶-2、表皮生长因子与多囊卵巢综合征患者早期流产的关系。
方法:实验分三组:有自然流产史的多囊卵巢综合征患者29例，无自然流产史的多囊卵巢综合征患者30例，同期初诊的输卵管性不孕患者30例作为对照组。观察组患者于月经干净3-7天时或闭经期或淋漓出血时行诊断性刮宫取得子宫内膜，对照组患者于月经干净3天至排卵前在宫腔镜下取得子宫内膜标本，4％中性甲醛溶液固定，石蜡包埋，采用免疫组织化学法测定COX-2及EGF的表达。检测项目及检测方法本实验所用COX-2鼠抗人单克隆抗体和EGF鼠抗人单克隆抗体试剂盒，实验步骤按试剂盒说明进行，以微波枸橼酸盐进行抗原修复，DAB显色，同时用PBS代替一抗作为染色的阴性对照。采用半定量积分法，随机选择10个具有代表意义的高倍视野，每个视野计数100个细胞中的阳性细胞数，即将阳性细胞的百分率及阳性细胞着色强度分别进行分级记分，然后根据两项之和确定其阳性强度。阳性细胞的百分率＜5％为0分;5％～25％为1分;26％～50％为2分;56％～75％为3分;＞75为4分;阳性细胞的着色强度为无色或着色很弱，0分;淡棕黄色，1分;棕黄色，2分;深棕黄色或胞浆内出现深棕色斑块，3分。阳性细胞的百分率和阳性细胞着色强度相加，0分为阴性(-)，1～3分为弱阳性(+)，4～7分为强阳性（++～+++）。
结果:
1、有自然流产史的多囊卵巢综合征患者29例，子宫内膜环氧化酶-2阳性者7例，阳性率24.13％，对照组患者30例，子宫内膜环氧化酶-2阳性者17例，阳性率56.67％，多囊卵巢综合症患者组的子宫内膜环氧化酶-2阳性表达率明显低于正常子宫内膜组中环氧化酶-2的表达，两组间差异均有显著性;
2、有自然流产史的多囊卵巢综合征患者29例，子宫内膜表皮生长因子阳性者12例，阳性率41.37％，对照组患者30例，子宫内膜表皮生长因子阳性者21例，阳性率70％，多囊卵巢综合症患者组的子宫内膜表皮生长因子阳性表达率也明显低于正常子宫内膜组中表皮生长因子的表达;
3、有自然流产史的多囊卵巢综合征患者29例，子宫内膜环氧化酶-2阳性者7例，阳性率24.13％，无自然流产史的多囊卵巢综合征患者30例，子宫内膜环氧化酶-2阳性者9例，阳性率30.00％，有自然流产史的多囊卵巢综合征患者与无自然流产史的多囊卵巢综合征患者两组间子宫内膜环氧化酶-2的表达无差异性;
4、有自然流产史的多囊卵巢综合征患者30例，子宫内膜表皮生长因子阳性者12例，阳性率41.73％，无自然流产史的多囊卵巢综合征患者30例，子宫内膜表皮生长因子阳性者12例，阳性率40.00％，而有自然流产史的多囊卵巢综合征患者与无自然流产史的多囊卵巢综合征患者两组间子宫内膜表皮生长因子的表达无差异性。
结论:环氧化酶-2、表皮生长因子在多囊卵巢综合症患者及正常对照组的子宫内膜都有表达，提示这两种因子与子宫内膜容受性相关。环氧化酶-2、表皮生长因子在子宫内膜组织的表达明显低于正常对照组，提示多囊卵巢综合症患者子宫内膜内膜环氧化酶-2、表皮生长因子的低表达与高流产率相关。有自然流产史的多囊卵巢综合征患者与无自然流产史的多囊卵巢综合征患者两组间子宫内膜环氧化酶-2、表皮生长因子的表达无差异性，提示多囊卵巢综合征患者存在高流产率。