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背景与目的：多发性硬化（Multiple sclerosis，MS）是一种中枢神经系统（Central nervous system，CNS）自身免疫性疾病，炎症反应在其疾病发生和发展过程中起着重要的作用。白细胞介素-27（Interleukin-27，IL-27）是近年来新发现的IL-12家族成员之一，主要由激活的抗原递呈细胞APC、巨噬细胞和树突状细胞DCs分泌产生。自IL-27被发现以来，已显示出在免疫反应调控中的独特作用：诱导Th1细胞的分化，抑制Th2细胞和Th17细胞的发育；在高度Th1细胞极化时，IL-27的主要作用是限制Th1型免疫反应的强度和持续时间，从而保护机体免受过度的免疫反应的损伤，同时具有促炎与抗炎的双重特征。炎症性趋化因子5（RANTES/CCL5）是T淋巴细胞产生的炎性趋化因子之一，可以诱导白细胞粘附并穿过血脑屏障（Blood-brainbarrier，BBB）进入CNS，从而引起一系列的炎症反应和继发病变。研究发现，在缓解-复发型MS中，抑制CCL5的表达可以预防疾病的复发。目前，有很多国内外研究及报道提示，在自身免疫性炎症性疾病中，机体内IL-27和CCL5存在一定的相关性，但目前并无其具体机制的相关研究及报道。本实验通过在体实验性自身免疫性脑脊髓膜炎（experimental autoimmune cerebrospinal meningitis，EAE）模型和离体培养腹腔巨噬细胞探索CCL5在EAE病变进程中受IL-27的变化调控的影响，并探索其机制，为预防MS的疾病进展和复发提供临床指导。方法：第一部分：将40只健康雌性C57BL/6小鼠用MOG31-55多肽免疫后0d、7d、15d、21d（每组10只），每天测其体重并观察老鼠行为学变化，用苏木精-伊红染色法（Hematoxylin-Eosin staining，HE）观察小鼠CNS中的炎症情况；用Western bloting（WB）和免疫组织化学方法测量IL-27和CCL5在中枢神经系统的表达。将50只C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、EAE组、IL-27+EAE组、SC144（IL-27受体拮抗剂）+EAE组、PBS（磷酸缓冲液）+EAE组，用WB和PCR方法测量CCL5的表达量。第二部分：用3%巯基乙酸盐（每只1毫升）腹腔注射C57BL/6小鼠3d后，取小鼠腹腔巨噬细胞。分别对原代小鼠腹腔巨噬细胞和RAW264.7细胞株进行培养，加入脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）炎性刺激因子诱导mCCL5的表达，加入重组IL-27和SC144进行干预调控，收取细胞用realtime PCR测定CCL5mRNA的表达量及半衰期，用WB测量IFN-γ和NF-κB的蛋白表达；收取细胞培养液，用ELISA测定CCL5的表达量。结果：1、EAE小鼠最早在免疫后12天开始发病，大多数均集中在14～18天发病，并于2～4天后达到疾病高峰，在发病高峰期时神经功能评分均数为2.38±0.52。2、HE染色示正常组小鼠脊髓无明显炎性细胞浸润；模型组炎性细胞浸润明显，血管周围有明显炎性细胞浸润，呈典型“血管袖套样”改变，且实质内亦有明显炎症细胞浸润，浸润的细胞类型以淋巴细胞为主，也可见少量胶质细胞。3、在EAE疾病的过程中，EAE小鼠脑白质中IL-27的表达量逐渐增高；而CCL5的表达量先升高后降低。与EAE模型组和对照组相比，IL-27干预组神经功能评分明显较降低，疾病高峰期相对延后，CCL5表达水平明显受到抑制（P<0.05）；SC144干预组神经功能评分明显较高，疾病高峰期相对提前，CCL5表达水平明显升高（P<0.05）。4、在细胞水平，与正常对照组相比，LPS组、LPS+IL-27刺激组、LPS+SC144+IL-27组CCL5的表达均增多；与LPS刺激组和LPS+SC144+IL-27组比较，LPS+IL-27刺激组CCL5mRNA表达明显下降（P<0.05），CCL5mRNA的半衰期缩短（P<0.05）。5、与正常对照组相比， LPS组、 LPS+IL-27刺激组、LPS+SC144+IL-27组IFN-γ和NF-κB的表达均增多（P<0.05）；与LPS刺激组和LPS+SC144+IL-27组比较，LPS+IL-27刺激组IFN-γ和NF-κB表达明显下降（P<0.05）。结论：在小鼠自身免疫性脑脊髓膜炎疾病进展期，IL-27加速CCL5mRNA的半衰期，从而在mRNA和蛋白水平抑制CCL5的表达，并发挥抗炎作用，其具体机制至少部分是基于抑制IFN-γ的表达实现的。鉴于CCL5诱导白细胞粘附并穿过血脑屏障进入CNS引起一系列的炎症反应和继发病变，干预IL-27的表达为抑制多发性硬化MS疾病进展并预防疾病复发提供新的临床指导。