【摘 要】
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目的:评价“抗帕颗粒”对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP）诱导帕金森病（Parkinson’s disease,PD）模型小鼠的行为学和肠道动力的影响,通过检测肠道菌群,探索“抗帕颗粒”可能通过调节肠道菌群,影响α-突触核蛋白（Alpha-synuclein,α-Syn）的表达,以及两者
【基金项目】
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浦东新区科技发展基金（PKJ2018-Y10）；
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目的:评价“抗帕颗粒”对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP）诱导帕金森病（Parkinson’s disease,PD）模型小鼠的行为学和肠道动力的影响,通过检测肠道菌群,探索“抗帕颗粒”可能通过调节肠道菌群,影响α-突触核蛋白（Alpha-synuclein,α-Syn）的表达,以及两者的相关性。方法:1.60只8周龄C57BL/6雄性小鼠随机分为5组:空白组（A组）、对照组（B1）、酪酸梭菌组（B2）、“抗帕颗粒”组（B3）、酪酸梭菌+“抗帕颗粒”（B4）,每组12只;2.B1-B4组腹腔注射剂量40mg/kg MPTP,每天1次,连续5d;A组腹腔注射同体积生理盐水,每天1次,连续5d。造模完成,进行行为学和肠道动力评估,明确制模成功;3.第8天起分组灌胃干预,B2组酪酸梭菌给药,B3组“抗帕颗粒”给药,B4酪酸梭菌+“抗帕颗粒”给药,A、B1灌胃同体积生理盐水,连续4M;4.在第15d、1M、2M、3M、4M进行行为学和肠道动力实验,评估各组小鼠运动和肠道动力的干预效果;5.4个月后脱颈法处死小鼠评估小肠传输率;制取标本,免疫荧光实验观察小鼠大脑黒质（Substantia nigra,SN）酪氨酸羟化酶（Tyrosine hydroxylase,TH）和α-Syn;免疫蛋白印记（western-blot,WB）检测小鼠SN、迷走神经、结肠中α-Syn表达量;小鼠肠道菌群高通量测序并进行生物信息分析。结果:1.造模后,与A组比较,MPTP诱导PD小鼠爬杆时间增加、悬挂时间缩短、漂浮时间延长（P＜0.05）;粪便颗粒减少、含水量降低、首粒排出时间延长（P＜0.05）,PD模型鼠表现行为损伤和肠道动力障碍;2.药物干预后,与A组比较,B1组行为学评分无明显改变,与B1组比较,“抗帕颗粒”组爬杆时间缩短、悬挂时间增加、漂浮时间减少（P＜0.05）;与A组比较,B1组肠动力评估无明显改变,与B1组比较,“抗帕颗粒”组粪便含水量增加、排便粒数增加、首便时间缩短、小肠传输率提高（P＜0.05）;3.WB显示,与A组比较,B1组小鼠SN、结肠、迷走神经的α-Syn表达增加（P＜0.05）,与B1组比较,“抗帕颗粒”组抑制SN、结肠、迷走神经的α-Syn表达量（P＜0.05）;4.免疫荧光结果,与A组比较,B1组小鼠的SN中α-Syn增加,TH减少,有显著差异（P＜0.05）,与B1组比较,“抗帕颗粒”SNα-Syn减少,TH阳性细胞增加（P＜0.05）;5.肠道微生物结果,PD小鼠厚壁菌门、梭菌纲、红蝽菌纲、梭菌目、红蝽菌目、毛螺菌科、红蝽菌科的相对丰度值明显升高（P＜0.05）,“抗帕颗粒”可以降低上述菌种相对丰度值（P＜0.05）。结论:1.“抗帕颗粒”可以改善PD模型鼠行为学损伤和肠道动力障碍;2.“抗帕颗粒”可以减少PD小鼠SN、迷走神经、结肠的α-Syn表达量;3.“抗帕颗粒”可以影响PD小鼠不同分类单元水平的肠道菌丰度。
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