二甲双胍在3T3-L1前脂肪细胞诱导过程中对v-SNAREs蛋白家族mRNA表达的影响

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目的:通过观察3T3-L1前脂肪细胞诱导分化过程中二甲双胍对v-SNAREs m RNA表达变化,探讨二甲双胍在GLUT4转运中的作用机制。方法:购买3T3-L1前脂肪细胞进行培养,当细胞生长至融合度达到100%或过融合时开始诱导,予以诱导液诱导分化,A液3天、B液1天,交替3次,共12天,在诱导过程中,分别给予不同浓度二甲双胍(0、0.5、1、2mmol/L)持续干预,第12天收集标本。诱导成脂通过油红O染色鉴定。运用RT-PCR技术检测脂肪细胞中AMPK、GLUT4、VAMP2、3、4、5、7、8的m RNA水平。实验数据应用SPSS13.0软件进行统计分析,组间差异采用单因素方差分析,组间多重比较用LSD检验,检验水准取a=0.05。结果:AMPK、VAMP4、VAMP7 m RNA结果以单因素方差分析无统计学意义。GLUT4、VAMP2、3、5、8 m RNA结果以单因素方差分析达统计学意义,再行LSD检验结果:1)与0mmol/L组相比,0.5mmol/L组GLUT4、VAMP2、3、8 m RNA水平无统计学差异(P>0.05);2)与0mmol/L组相比,1mmol/L组GLUT4、VAMP2、3、8 m RNA水平上调,差异达统计学意义(P<0.05);3)与1mmol/L组相比,2mmol/L组GLUT4、VAMP2、3、8 m RNA水平下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:二甲双胍可以作用于前脂肪细胞诱导分化过程中,在1mmol/L浓度范围内,随着二甲双胍浓度增加,可以上调脂肪细胞中GLUT4、VAMP2、3、8 m RNA的表达,且具有一定的剂量依赖效应。1mmol/L可能是二甲双胍在3T3-L1前脂肪细胞作用的最大浓度。二甲双胍可能通过调节v-SNAREs蛋白家族发挥对脂肪细胞GLUT4的转运的调控。当二甲双胍浓度达到2mmol/L,则下调脂肪细胞中GLUT4、VAMP2、3、8 m RNA的表达。本实验为进一步探索二甲双胍在GLUT4转运中的具体作用机制提供理论依据。
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