玉米和拟南芥Lip5在盐和干旱胁迫下的功能分析

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Lip5属于Vtal家族成员,在被称为溶酶体降解途径的胞内多泡体(MVB)途径中起作用,Lip5在植物生长、发育中起重要作用,可能与盐和干旱胁迫有联系。Lip5蛋白在植物体中作用机制的研究,扩充了Vtal家族的功能,同时也对植物抗逆性新品种的选育有重大的意义。本研究对玉米和拟南芥中编码Lip5蛋白的ZmLip5和AtLip5基因进行了初步的基因序列和功能分析,主要研究内容如下:1.生物信息学查找比对得到了玉米Lip5(GB:ACN36293)和拟南芥Lip5(AT4G26750)的cDNA序列,在序列比对和功能域预测与分析发现Lip5存在DUF605功能域,且不同物种之间存在差别。2.ZmLip5和AtLip5的表达模式分析。通过盐、干早处理玉米郑58和拟南芥(col 0),利用实时荧光定量PCR(real-timePCR)分析发现Lip5在胁迫时表达量升高;生物信息学分析得到ZmLip5启动子(ZmLip5-P)和AtLip5启动子(AtLip5-P)序列,构建启动子:GUS的植物表达载体,GUS组织化学染色显示,AtLip5在拟南芥的各个生长期均有不同程度的表达。3.通过对转有Z(?)mLip5和AtLip5酵母转基因菌株的甘露醇、盐胁迫发现:转有ZmLip5和AtLip5基因的酿酒酵母菌株会降低高盐、甘露醇的适应能力,特别是AtLip5、4.对拟南芥AtLip5的T-DNA插入突变体AtLip5进行盐和ABA胁迫,发现突变体表现为对盐和ABA的不敏感;获得了AtLip5的过表达转基因系。5.从47种玉米自交系材料中鉴定出了三种抗旱耐盐性好的、三种抗旱耐盐性差的自交系,在这6中自交系对照、盐和干旱处理后的Lip5表达量检测发现,Lip5的表达量与植株对盐和干旱的抗性与响应程度负相关;获得了ZmLip5的过表达转基因系。通过以上的研究,可以初步认定ZmLip5和AtLip5在植物抗旱耐盐性方面起负作用,但在分子和蛋白水平上还需要更多的研究来揭示它的作用机制。
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