甜梦口服液由17味中药组成,具有益气补肾,健脾和胃,养心安神的功效,用于治疗头晕耳鸣,视减听衰,失眠健忘,食欲不振,腰膝酸软,心慌气短,中风后遗症。对脑功能减退,冠状血管疾患,脑血管栓塞,脱发也有一定疗效。现行甜梦口服液的质量标准中只规定淫羊藿苷一个含量测定指标,难以全面反映甜梦口服液的质量,因此本文采用多种方法对甜梦口服液的质量进行更全面的分析及评价。采用单柱及柱切换技术建立甜梦口服液HPLC指纹图谱并结合多成分的定量分析综合分析评价甜梦口服液的质量;采用高分辨液质联用技术研究甜梦口服液的化学物质基础;通过谱效关系研究确定甜梦口服液中与抗氧化活性相关的成分;通过网络药理学研究探索甜梦口服液的作用机制。通过上述研究,为甜梦口服液质量标准的提升和完善提供参考。本文的研究内容主要包括以下几个部分:1.甜梦口服液HPLC指纹图谱的建立首先建立了基于C18单根色谱柱的甜梦口服液HPLC指纹图谱,测定了 12批次样品,采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版”匹配得到了 16个共有峰,通过相似度分析和聚类分析可准确区分过期样品与未过期样品,实现甜梦口服液的质量评价。对于成分非常复杂的中药制剂,单根色谱柱分离能力有限,难以达到理想的分离效果,因此我们又采用六通阀连接的C18和C8柱切换技术建立甜梦口服液的HPLC指纹图谱,测定了 12批次样品,匹配得到了 25个共有峰,相比于单柱建立的指纹图谱,分离效果更好,峰容量更高,反映的成分信息更加丰富和全面。结合相似度分析和聚类分析可实现过期与未过期样品的区分,为中药制剂质量控制及评价提供更有效的参考方法。2.甜梦口服液多成分的定量分析首先采用指纹图谱的色谱方法测定25批次甜梦口服液的刺五加苷B、绿原酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、橙皮苷和淫羊藿苷5种成分的含量;对于含量较低的阿魏酸、芒柄花素、宝藿苷Ⅰ、牡荆素鼠李糖苷、毛蕊花糖苷、异嗪皮啶、士的宁和马钱子碱8种成分,采用液质联用技术进行含量测定。绝大多数成分的含量在过期样品与未过期样品中差异较大,表明过期样品与未过期样品的质量存在差异。结合主成分分析,过期样品与未过期样品中宝藿苷Ⅰ、毛蕊花糖苷和刺五加苷B等成分的含量存在显著差异,可作为甜梦口服液质量控制指标的参考依据。3.甜梦口服液化学成分的定性分析采用液质联用技术研究甜梦口服液的化学成分,分析质谱数据并参考文献信息,共鉴定96个化学成分,包括46个黄酮、19个有机酸、8个三萜、8个苷类、4个氨基酸、3个生物碱和8个其他化合物,初步明确了甜梦口服液的化学物质基础。4.甜梦口服液的HPLC指纹图谱与抗氧化活性的相关分析分别采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除实验和铁离子还原/抗氧化能力法测定25批次甜梦口服液的抗氧化活性,同时测定各批次样品的HPLC指纹图谱。利用正交信号校正-偏最小二乘回归法分析甜梦口服液指纹图谱与两种抗氧化活性的相关性,确定甜梦口服液与抗氧化活性相关的成分为橙皮苷、儿茶酚和 woodorien。5.网络药理学研究甜梦口服液的作用机制将甜梦口服液鉴定的96个化合物纳入分析,按照口服生物利用度≥30%和类药性≥0.18筛选活性成分。通过检索数据库预测成分靶点,甜梦口服液的18个活性成分主要作用于267个靶蛋白,对成分-靶点网络进行拓扑结构分析,PTGS2、HSP90AB1、PTGS1、NCOA2和CALM是甜梦口服液主要作用的靶点。蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络包括218个靶蛋白,MAPK1、MAPK3、TP53、AKT1和JUN等是PPI网络的主要靶点,推测甜梦口服液与这些靶点直接或间接作用发挥疗效。甜梦口服液成分-靶点网络的49个关键靶蛋白富集在19条GO功能和64条KEGG通路中。通过文献信息对其主要作用靶点及通路进行初步验证,为深入研究甜梦口服液的作用机制提供方向。