论文部分内容阅读
特异性强、灵敏度高的重金属、毒素的快速检测方法,对于食品安全有着重大的意义。通过指数富集配体系统进化技术（SELEX）筛选得到的核酸适体,在毒素、重金属的检测等很多领域有重要作用。本论文选取了代表性的生物毒素（赭曲霉毒素）和重金属离子(Hg2+)作为检测对象,以核酸适配体为基础,构建了检测Hg2+的核磁共振方法,以及胶体金和量子点试纸条检测赭曲霉毒素（OTA）的方法。本文以这几个方面为主要内容:1、制备了核酸适配体功能化的胶体金试纸条,采用竞争法检测OTA,主要优化了金标核酸适配体的偶联比、重悬液体系、硝酸纤维素膜和结合垫上点样量等条件。在金:核酸=1:10,0.01M pH7.4 PB（含0.5%PEG,1%蔗糖,0.1%Tween20,0.02% MgSO4,0.05% （NH4）2SO4）的溶液体系下,采用CN140硝酸纤维素膜,试纸条能够在15min内实现对OTA的定性及半定量测。肉眼检测限2.5ng/mL,标准曲线得到的线性范围0.2-2.5ng/mL,检测限0.18ng/mL。2、构建了核酸适配体的量子点荧光试纸条,采用竞争法,量子点与适配体偶联后,优化重悬液体系、硝酸纤维素膜和结合垫上点样量等条件。发现在0.01M pH7.4 PB（含1.5%PVP,1%蔗糖,0.1%Tween20、0.02% MgSO4,0.05% （NH4）2SO4）体系中,采用M135硝酸纤维素膜,试纸条能够在15min内实现对OTA的定性及半定量测,在最优条件下,肉眼检测限5ng/mL,标准曲线得到的线性范围2.2-10ng/mL,检测限1.9ng/mL。3、优化磁粒子标记适配体的偶联比以后,探针与Hg2+反应,形成T-Hg2+-T错配结构,磁粒子发生聚集,水中质子状态变化。利用核磁共振成像仪器,得到T2加权图像,T2造影图像。实验结果中,随着Hg2+浓度的提高,水中的质子环境改变越多,MRI图像强度减弱,即T2加权图像强度变暗,T2弛豫时间逐渐减小,线性范围0.25pg/mL-10pg/mL,检测限0.15pg/mL。