透钙磷石涂层浸提液掺锶对MC3T3-E1细胞成骨相关因子表达的影响

来源 :河北联合大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:zhaoyuanhappy200
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目的透钙磷石(Brushite)是磷酸钙(CPC)的一种,具有良好的生物相容性,在生理条件下具有较快的降解速率。同时低剂量的锶(Sr)具有促进骨形成,抑制骨吸收等优点。本文采用电化学沉积方法对纯钛表面进行改性处理,形成透钙磷石涂层。利用浸提方法配制其浸提液,并向配制好的浸提液中加入所需浓度的锶。通过体外细胞学实验对二者协同作用于成骨细胞进行相关研究,为优化锶浓度提供理论依据。方法利用电化学沉积方法制备含透钙磷石涂层的钛片,再利用浸提方法制备其浸提液,并向配制好的浸提液中加入所需浓度的锶。将MC3T3-E1细胞置于掺锶的含透钙磷石涂层钛片的浸提液中进行培养,检测不同含锶量的透钙磷石涂层钛片的浸提液中MC3T3-E1细胞活性、碱性磷酸酶(ALP)活性及并利用Real-time PCR(RT-PCR)技术检测各组细胞因子碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况。结果实验结果显示MC3T3-E1细胞受到Sr的影响。Br+Sr_M组和Br+Sr_H组细胞活性较Brushite组明显增高,结果有统计学意义(99.97±7.53vs.58.25±2.76,P<0.05;85.96±7.37vs.58.25±2.76,P<0.05)。Br+Sr_M组细胞ALP比活性较Br+Sr_L组和Br+Sr_H组明显增高,结果有统计学意义(99.97±7.53vs.63.56±3.69,P<0.05;99.97±7.53vs.85.96±7.37,P<0.05)。MC3T3-E1成骨细胞在各浸提液中培养3d后, Br+Sr_L组、Br+Sr_M组和Br+Sr_H组bFGF表达水平较Brushite组显著增高(8.54±0.49vs.0.87±0.02,P<0.05;12.05±0.20vs.0.87±0.02,P<0.05;4.88±0.14vs.0.87±0.02, P<0.05); Br+Sr_L组bFGF表达水平较Br+Sr_M组显著降低(8.54±0.49vs.12.05±0.20,P<0.05),较Br+Sr_H组显著增高(8.54±0.49vs.4.88±0.14,P<0.05)。MC3T3-E1成骨细胞在各浸提液中培养5d后,Br+Sr_M组和Br+Sr_H组的bFGF表达量明显高于Brushite组(151.72±6.33vs.14.11±1.05,P<0.05;200.74±14.43vs.14.11±1.05,P<0.05);Br+Sr_H组的bFGF表达水平显著高于Br+Sr_M组(200.74±14.43vs.151.72±6.33,P<0.05)。Br+Sr_L组、Br+Sr_M组和Br+Sr_H组的VEGF表达量均明显高于Brushite组(4.01±0.15vs.0.97±0.09, P<0.05;22.44±1.34vs.0.97±0.09, P<0.05;10.31±1.02vs.0.97±0.09,P<0.05); Br+Sr_M组的VEGF表达量明显高于Br+Sr_L组和Br+Sr_H组(22.44±1.34vs.4.01±0.15, P<0.05;22.44±1.34vs.10.31±1.02,P<0.05)。实验结果提示Sr对MC3T3-E1细胞的活性及成骨相关因子的表达有影响。结论透钙磷石具有良好的生物活性,具有良好的诱导成骨细胞分裂、分化的作用。而向透钙磷石中掺入不同浓度的锶,可以在一定程度上促进细胞ALP、bFGF和VEGF的表达,从而明显增强其对成骨细胞分化的诱导作用,这些作用在向透钙磷石浸提液中掺入含量为0.5%的锶时最为明显。因此适量掺锶的透钙磷石作为一种生物工程材料可能具有广泛的应用前景。同时实验结果显示锶对成骨细胞的作用可能是通过上调ALP、bFGF和VEGF mRNA的表达水平,因此在将这些因子作为潜在作用靶点进行生物工程材料的研制工作中,本课题的结果也具有一定的参考价值。
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