水稻多梳家族蛋白OsFIE1和OsFIE2的功能鉴定及互作蛋白筛选

来源 :沈阳农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:woxiaosong
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
水稻是重要的粮食作物,抽穗期和胚乳发育等是影响水稻生产的重要性状,发掘抽穗期调控关键基因,鉴定水稻胚乳形成过程中的关键基因,解析调控机制是精准调控水稻生产的关键。多梳蛋白家族(Pc G)通过修饰染色质,在抑制基因表达中起着重要作用。Pc G蛋白通常形成多个蛋白质复合体,如多梳抑制复合体1(PRC1)和多聚体抑制复合体2(PRC2),PRC2复合物通过组蛋白3上的赖氨酸27三甲基化来抑制基因表达。已有报道表明,在拟南芥中,PRC2复合体被鉴定是植物正常发育所必需的,参与调控拟南芥开花、分化、胚乳形成等关键的发育过程,但其在水稻中的同源物功能及调控机制还有待挖掘。水稻Esc核心组件编码基因Os FIE1和Os FIE2作为水稻PRC2复合体中FIS-PRC2的一部分,在之前的研究报道中,参与调控胚乳的发育和种子的大小。本研究中,利用反向遗传的方法创制Os FIE1和Os FIE2的CRISPR/Cas9基因编辑突变并通过表型观察、定量PCR、酵母双杂交等方法开展研究,得到如下结果:1.获取Os FIE1和Os FIE2基因CDS序列,设计引物,构建CRISPR/Cas9基因编辑载体,用农杆菌侵染法转化水稻品种SN9816,得到的T0代纯合突变株系。突变体表现为抽穗期提前,株高变矮,产量降低。2.测量了野生型SN9816、osfie1突变体的产量相关性状。结果显示,osfie1的结实率显著低于野生型,粒长和粒宽与野生型存在一定差异。osfie1的穗长及千粒重均低于野生型,osfie1突变体的产量相较野生型有所降低。3.选取了在短日照条件下播种45天和长日照条件下播种55天的osfie1和SN9816,利用q RT-PCR技术,来进一步探究Os FIE1调控水稻抽穗期的通路。在短日照条件下,osfie1中Ghd7的表达量下调,而在长日照条件下,osfie1中Ghd7的表达量上调;Ehd1在长短日照中的表达量上调。根据结果推测,影响Os FIE1调控的靶基因有可能在Ghd7和Ehd1上游,有待后续继续深入探索4.通过酵母双杂交技术利用构建的水稻c DNA文库,Os FIE1基因共筛选到阳性克隆130个,经测序鉴定得到候选互作蛋白60个,Os FIE2基因共筛选到阳性克隆为162个,经测序鉴定得到候选互作蛋白55个,其中Os FIE1和Os FIE2都筛选到了互作蛋白Os MT2b。为深入挖掘Os FIE1和Os FIE2的作用机制提供了新的方向。综上所有结果所示,Os FIE1和Os FIE2最有可能与Os MT2b互作,影响植物体内激素水平从而调节水稻生长发育,本结果为后续深入研究基因功能打下良好的基础。
其他文献
高尿酸血症肾病在雏鹅体内多发,是以高水平尿酸为诱因同时伴有肾脏损伤,常见的代谢性疾病。课题组前期研究发现牛磺酸能够降低大鼠高尿酸水平,逆转肾脏损伤。但牛磺酸对雏鹅高尿酸血症肾病的预防作用及其调控机制尚不明确,有待进一步研究。本试验选取10日龄雏鹅60只,随机分为4组,每组15只。其中,对照组(C)饲喂全价鹅饲料;高尿酸血症肾病模型组(M)饲喂高蛋白高钙日粮,牛磺酸预防组(MT)饲喂高蛋白高钙日粮+
学位
<正>阅读可以帮助我们建立良好的行为习惯,丰富我们的精神世界,增长我们的知识见解。在整书阅读中可以综合运用不同的方法,来提高学生整体阅读水平,提升学生的思辨能力。叶圣陶先生在《论中学国文课程的改订》中指出:“国文教材似乎该用整本的书,而不该用单篇短章,像以往和现在的办法。退一步说,也该把整本的书作主体,把单篇短章作辅佐。”叶老先生很早就提出整书阅读的重要性,随着统编教材“快乐读书吧”的设定,也为实
期刊
为推进生态文明建设、落实绿水青山就是金山银山理念,我国启动了生态系统生产总值(GEP)核算。GEP核算为绿色金融提供了新的创新领域和技术支撑。本文在对GEP核算进行概述性分析基础上,研究GEP核算在金融领域应用面临的难点,总结国内外可借鉴的经验做法,提出我国GEP核算金融应用的政策启示。
期刊
松萝酸为松萝属植物地衣(Usnea lichen)的次级代谢产物,具有抗菌、抗炎、抗寄生虫、抗肿瘤等多种生物活性,是潜在的新型抗菌、抗癌候选先导化合物。但由于松萝酸水溶性差,限制了它的进一步应用。本试验首次将松萝酸与聚己内酯-聚乙二醇(PCL-PEG)载体材料结合,采用薄膜分散法制备松萝酸胶束,旨在提高松萝酸的水溶性,并进一步讨论松萝酸胶束的抗菌活性及其药代动力学特征。本研究采用薄膜分散法制备松萝
学位
阅读是人们获取信息、掌握知识,以及了解世界的主要渠道,亦是人类进行学习活动的主要手段。相较于其他阅读形式,整书阅读具有开放性的议题以及开放性的教学结构。从本质上而言,整书阅读是课外名著阅读而非课内教材阅读,这一学科特性对于教师教学风格以及学生思辨能力的培养与思维创造力的激发具有积极的意义。整书阅读并不限定单一化的议题,开放性的阅读对教学程序及其延展内容并没有严格的规定。将小学语文整书阅读与STEM
期刊
木犀草素是天然黄酮类化合物,具有抗菌、抗炎等药理作用,但是由于其不易溶于水,在临床上推广应用受到极大限制。本研究通过改变木犀草素的剂型,将木犀草素与纳米载体结合,以增加木犀草素的溶解度;并进一步对制备的木犀草素纳米复合物进行药效学和药动学特征评价,为木犀草素新制剂的开发和利用提供比较详实的理论依据。本试验应用紫外-可见分光光度法检测木犀草素浓度,再制备木犀草素纳米复合物,以包封率为指标进行单因素考
学位
氮肥是水稻生产中最重要的肥料,是保证水稻产量的关键前提。如今现代农业迅猛发展,优质稻米的生产和消费已成为当前发展稻米生产的迫切需求,分蘖是衡量水稻个体是否强壮的重要指标,是决定作物产量的重要因素,而氮肥对水稻分蘖的调控起着至关重要的作用。本试验从调节分蘖肥的角度来说明出现此现象的原因,通过设置7个分蘖肥梯度,CK、400、402、412、422、432、442(总氮量225kg/hm~2),来调控
学位
禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)根据血凝素(Hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)的差异可以分为16个HA亚型和9个NA亚型。野鸟是AIV的天然宿主,可以感染所有亚型AIV。对野鸟流感病毒进行监测和评估能够为新发流感病毒的早期预警和防控提供一定的理论依据。H13亚型野鸟流感病毒在我国青海省、山东省和辽宁省等地均有发现,并且
学位
非洲猪瘟(ASF)是一种引起家猪和野猪高致命性、高传染性和高死亡率的传染病,目前无安全有效的疫苗。非洲猪瘟病毒(ASFV)编码150-200种蛋白,包括50多种结构蛋白,100多种非结构蛋白,但大部分蛋白功能未知。本研究拟构建ASFV I9R、B125R、F317L重组蛋白,分析其反应原性和免疫表型,以期为ASFV蛋白功能的研究及疫苗研究奠定初步基础。本研究首先使用生物信息技术分析ASFV蛋白I9
学位
在北方稻区的育种实践中,育种者常以日本优质米品种与当地主栽的高产品种杂交来培育高产优质相结合的理想粳稻新品种。但由于中日水稻品种在株型、抗倒伏性、需肥特性、产量形成特点上存在较大差异,后代群体在上述性状上的表现也不尽相同。本研究以北方稻区株型紧凑、穗型直立、耐肥抗倒、具高产潜力的代表性品种辽粳5号与日本典型的株型披散、穗型弯曲、不耐肥且易倒伏的低产优质米品种秋田小町杂交构建的F13代重组自交系群体
学位