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摘要目的：克隆小鼠血管细胞粘附分子1(vascular cell adhesion molecule-1, VCAM-1)cDNA全长,构建绿色荧光蛋白标记的VCAM-1基因逆转录病毒载体。探讨VCAM-1基因在间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSC)中过表达对细胞免疫学特性的影响,为优化MSC的临床应用提供依据。方法：采用DNA重组技术,将目的基因VCAM-1克隆至含有报告基因EGFP的逆转录病毒表达载体MIGR1中；在脂质体介导下,将重组的逆转录病毒表达质粒转染293T细胞,收获携带VCAM-1基因的重组逆转录病毒的上清,并感染MSC细胞系C3H10T1/2,荧光显微镜下观察细胞形态和感染效率；流式细胞术检测MSC膜表面的VCAM-1表达情况；3H-TdR掺入法测定过表达VCAM-1的MSC对其免疫学特性的影响。结果：成功构建过表达VCAM-1基因的逆转录病毒载体,流式细胞术检测结果表明VCAM-1在MSC细胞系C3H10T1/2中稳定高表达。进一步,过表达VCAM-1基因的MSC细胞系C3H10T1/2形态无改变。与转染空载体的C3H10T1/2相比,过表达VCAM-1的C3H10T1/2对于有丝分裂原诱导的T淋巴细胞增殖抑制作用显著增强,且这种抑制效应呈剂量依赖性,随着C3H10T1/2细胞数量的逐渐增加,其抑制效应逐渐增强。当C3H10T1/2与效应细胞比例为1：10时,转染了空载体的C3H10T1/2组淋巴细胞增殖活性(cpm值)降低了29.8%,而过表达VCAM-1的C3H10T1/2组则降低了65.3%,,抑制率是空载体C3H10T1/2组的2.16倍。结论：过表达VCAM-1可显著增强间充质干细胞系C3H10T1/2抑制T细胞活化的能力,为下一步利用过表达VCAM-1的MSCs治疗相关免疫疾病奠定了实验基础和理论依据。图9幅,表13个,参考文献53篇。