D-缬氨酸是一种重要的手性源,可以作为合成农药、兽药和医药的中间体。目前制备D-缬氨酸的方法有立体不对称合成法、诱导结晶法、化学拆分法和微生物法。与前三种方法相比,利用微生物法来制备D-缬氨酸,有高立体选择性、反应条件温和、反应过程绿色无污染的优势。本实验室首次从自然界中筛选出了一株麦芽糖假丝酵母菌DLPU-zpb(Candida maltosa),它具有对DL-缬氨酸的不对称降解活性,它可以降解DL-缬氨酸中的L-缬氨酸,几乎不降解D-缬氨酸,从而可以实现由DL-缬氨酸来制备D-缬氨酸,本论文对麦芽糖假丝酵母菌不对称降解制备D-缬氨酸进行了研究。为获得高效降解L-缬氨酸的菌株,采用驯化、梯度平板、紫外诱变、DES诱变等方法,对麦芽糖假丝酵母原始菌株进行选育,最终选育出一株具有高效降解L-缬氨酸活性的DES诱变菌株,与原始菌株相比,L-缬氨酸降解率提高了15%左右。采用同步培养降解法降解L-缬氨酸,优化后的降解条件为:培养基组成为葡萄糖5g/L、酵母浸粉10 g/L、蛋白胨10 g/L、L-缬氨酸25 g/L,培养基初始pH值为5.0,装液量40ml/250ml,转速180 r/min,温度为30℃,接菌量10%,并且每24 h向培养基中补充相同浓度的葡萄糖,最终在96 h内,可以将浓度为25 g/L的L-缬氨酸几乎全部降解。采用静息细胞降解法制备D-缬氨酸,在摇瓶条件下,可以在98 h内,将浓度为35g/L的底物L-缬氨酸完全降解;通过向发酵罐中进行补料的方式,可以将浓度接近40 g/L的底物L-缬氨酸完全降解;最后以浓度为50 g/L的DL-缬氨酸为底物,进行不对称降解反应,在72 h内,将L-缬氨酸完全降解,从而可以制备高纯度的D-缬氨酸,实现由DL-缬氨酸来制备D-缬氨酸的目的,有一定的工业化意义。