参蛤散对慢性心力衰竭大鼠相关生物标志物的干预作用

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目的  运用参蛤散治疗压力超负荷致心衰大鼠并观察其疗效,探讨参蛤散治疗心衰的理论基础和作用机制,拓展中医药干预心衰的新思路,为参蛤散临床上进一步研究、推广应用及新药开发提供依据。  方法  1.选取SPF级雄性Wistar大鼠,采用腹主动脉缩窄法构建压力超负荷性心衰大鼠模型,假手术组只行腹部切开缝合术而不缩窄腹主动脉。造模2个月后,超声心动图验证心衰模型,将造模成功的心衰存活大鼠随机分为模型组、参蛤散组和卡托普利组。假手术组和模型组均给予蒸馏水灌胃,参蛤散组和卡托普利组分别给予对应药物灌胃。灌胃期间观察大鼠的一般情况,如体重、精神状态、口唇颜色等,给药4个月后,全部大鼠麻醉后取相关标本。  2.ELISA检测大鼠血清AngⅡ和TIMP-1、血浆NT-proBNP和TNF-a的浓度,real-timePCR检测左心室组织MMP-2基因表达,HE染色观察心肌病理形态。  结果  1.与假手术组相比,模型组血清AngⅡ、血浆NT-proBNP和TNF-a浓度均升高,血清TIMP-1浓度降低,左心室组织MMP-2基因表达明显增高。  2.与模型组相比,参蛤散组和卡托普利组血清AngⅡ、血浆NT-proBNP和TNF-a浓度降低,血清TIMP-1浓度升高,左心室组织MMP-2基因表达降低。  3.HE染色结果比较  假手术组:心肌细胞和间质纤维组织排列整齐,细胞核形态和大小基本一致,染色质表现均匀,心肌细胞未见断裂、萎缩、肥大和排列紊乱等异常现象,亦未出现间质细胞增生,更少见血管扩张充血。  模型组:心肌纤维排列紊乱,局部心肌纤维肥大,部分溶解,大部分区域心肌细胞纤维化,间质纤维组织增生明显,细胞核肥大,心肌细胞出现变性、断裂及萎缩等异常现象,血管扩张充血明显。  参蛤散组和卡托普利组:大部分心肌细胞排列较整齐,局部可见紊乱,心肌组织结构略有松弛,未见明显间质纤维组织增生,未出现明显肥大和断裂,未见明显血管扩张充血。  结论  1.腹主动脉缩窄法所致压力超负荷性心衰大鼠模型,神经内分泌-细胞因子过度激活,AngⅡ、NT-proBNP、TNF-a高表达;MMP-2活性升高,而TIMP-1活性降低,MMP-2/TIMP-1平衡失调,符合心衰发生发展的病理进程表现。  2.中药古方参蛤散应用于压力超负荷性心衰大鼠模型,能够降低心衰大鼠血清AngⅡ、血浆NT-proBNP和TNF-a浓度,升高血清TIMP-1浓度,降低左心室组织MMP-2基因表达,其作用机制可能与延缓心室重构,拮抗神经内分泌-细胞因子的过度激活,降低AngⅡ、NT-proBNP、TNF-a的表达,降低MMP-2的活性,提高TIMP-1的活性及调节MMP-2/TIMP-1平衡有关,亦即通过参蛤散对心衰相关生物标志物的干预作用而体现的。  3.“异病同治”、“五脏相关”充分体现了中医药的特色和优势,能够有效的指导治疗,结合心衰的辨治特点,心衰病位在心,与肺肾肝脾诸脏相关,尤其与肺、肾关系最为密切。心衰重在治心,兼顾四脏,其中尤以治肺、治肾为要。古方参蛤散应用于心衰的治疗,不仅拓展了参蛤散的使用范围,并且为心衰的临床治疗提供了新的思路
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