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目的:证明中医复方培元抗癌汤对肝癌肺转移肿瘤微环境模型中MMP2、MMP9、CXCL1、CXCL2有调节作用,通过调节以上因子能起到调节肝癌微环境、干预肿瘤进展及转移的目的,为中西医结合治疗中晚期肝癌提供证据。
方法:从同批次、质量均在20±2g的50只雌性健康昆明小鼠中,随机选出8只作为空白组,剩余42只小鼠分别经小鼠尾静脉,注射浓度为1×107/ml的鼠源性肝癌细胞株H22(2ml/只),挑选40只并随机分4组:荷瘤组、替加氟组、培元抗癌汤组、替加氟+培元抗癌汤组。每组连续用相应的药物灌胃14天,1次/天,0.2ml/次。灌胃结束后,解剖小鼠,取出肺组织,镜下观察肺部转移结节数目并记录,计算肺转移抑制率。免疫组化法检测转移瘤中MMP2、MMP9蛋白表达水平,并进行组间数据统计分析。ELISA检测小鼠血中CXCL1、CXCL2的水平,记录并统计分析。
结果:1.通过单因素方差分析比较各组间肺转移结节数,组间差异有统计学意义(F=30.788,P=0.00)。空白组与荷瘤组、替加氟组、培元抗癌汤组、中西医组结节数比较有统计学意义(P<0.05),荷瘤组与中药组、中西医结合组比较有统计学意义(P<0.05),与替加氟组比较无统计学意义(P>0.05),替加氟组与中西医组比较有统计学意义(P<0.05)、与培元抗癌汤组比较无统计学意义(P>0.05),培元抗癌汤组与中西医组比较有统计学意义(P<0.05)。西药组、中药组、中西医组转移抑制率分别为11%、27%、49%,中西医结合组疗效优于单药组。2.采用综合评分法,根据细胞着色深度及阳性细胞数最终得出:MMP2、MMP9在空白组中呈弱阳性,在荷瘤组中呈强阳性,在替加氟组与培元抗癌汤组中呈中阳性,在中西药联合组中呈阳性。3.通过单因素方差分析比较各组间CXCL1和CXCL2差异,CXCL1的组间差异有统计学意义(F=21.827,P=0.000),CXCL2的组间差异有统计学意义(F=48.217,P=0.000)。中药组、中西医联合组均对肺转移癌外周血中CXCL1有抑制作用,替加氟组无抑制作用。西药组、中药组、中西医联合组均对肺转移癌外周血中CXCL2有抑制作用。中西医组疗效优于替加氟组,与培元抗癌汤组相比疗效无差异。两组数据均表明中西结合组疗效优于单药组。
结论:1.空白组小鼠的一般情况最好,培元抗癌汤和替加氟联合组的一般情况优于培元抗癌汤组、替加氟组,荷瘤组小鼠的一般情况最差。2.中药复方培元抗癌汤,能抑制H22荷瘤小鼠肺转移结节数目,对肝癌肺转移有治疗作用;3.中药复方培元抗癌汤和替加氟联合应用,对H22荷瘤小鼠肝癌肺转移结节有抑制作用,且优于单药组;4.培元抗癌汤能有效抑制肝癌肺转移模型中MMP2、MMP9、CXCL1、CXCL2的水平,为中西医结合治疗肝癌的转移提供了思路。
方法:从同批次、质量均在20±2g的50只雌性健康昆明小鼠中,随机选出8只作为空白组,剩余42只小鼠分别经小鼠尾静脉,注射浓度为1×107/ml的鼠源性肝癌细胞株H22(2ml/只),挑选40只并随机分4组:荷瘤组、替加氟组、培元抗癌汤组、替加氟+培元抗癌汤组。每组连续用相应的药物灌胃14天,1次/天,0.2ml/次。灌胃结束后,解剖小鼠,取出肺组织,镜下观察肺部转移结节数目并记录,计算肺转移抑制率。免疫组化法检测转移瘤中MMP2、MMP9蛋白表达水平,并进行组间数据统计分析。ELISA检测小鼠血中CXCL1、CXCL2的水平,记录并统计分析。
结果:1.通过单因素方差分析比较各组间肺转移结节数,组间差异有统计学意义(F=30.788,P=0.00)。空白组与荷瘤组、替加氟组、培元抗癌汤组、中西医组结节数比较有统计学意义(P<0.05),荷瘤组与中药组、中西医结合组比较有统计学意义(P<0.05),与替加氟组比较无统计学意义(P>0.05),替加氟组与中西医组比较有统计学意义(P<0.05)、与培元抗癌汤组比较无统计学意义(P>0.05),培元抗癌汤组与中西医组比较有统计学意义(P<0.05)。西药组、中药组、中西医组转移抑制率分别为11%、27%、49%,中西医结合组疗效优于单药组。2.采用综合评分法,根据细胞着色深度及阳性细胞数最终得出:MMP2、MMP9在空白组中呈弱阳性,在荷瘤组中呈强阳性,在替加氟组与培元抗癌汤组中呈中阳性,在中西药联合组中呈阳性。3.通过单因素方差分析比较各组间CXCL1和CXCL2差异,CXCL1的组间差异有统计学意义(F=21.827,P=0.000),CXCL2的组间差异有统计学意义(F=48.217,P=0.000)。中药组、中西医联合组均对肺转移癌外周血中CXCL1有抑制作用,替加氟组无抑制作用。西药组、中药组、中西医联合组均对肺转移癌外周血中CXCL2有抑制作用。中西医组疗效优于替加氟组,与培元抗癌汤组相比疗效无差异。两组数据均表明中西结合组疗效优于单药组。
结论:1.空白组小鼠的一般情况最好,培元抗癌汤和替加氟联合组的一般情况优于培元抗癌汤组、替加氟组,荷瘤组小鼠的一般情况最差。2.中药复方培元抗癌汤,能抑制H22荷瘤小鼠肺转移结节数目,对肝癌肺转移有治疗作用;3.中药复方培元抗癌汤和替加氟联合应用,对H22荷瘤小鼠肝癌肺转移结节有抑制作用,且优于单药组;4.培元抗癌汤能有效抑制肝癌肺转移模型中MMP2、MMP9、CXCL1、CXCL2的水平,为中西医结合治疗肝癌的转移提供了思路。