哮喘患者血清自噬相关蛋白Beclin1、LC3的表达及临床意义

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目的通过检测支气管哮喘(简称哮喘)患者血清自噬相关蛋白Beclin1、微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein1 light chain 3,LC3)的浓度,探讨支气管哮喘患者血清中Beclin1、LC3的表达水平及其临床意义。方法收集2020年12月-2021年12月时间内,在沈阳医学院附属第二医院住院的支气管哮喘急性发作患者105例为哮喘组,分别为血中嗜酸性粒细胞(eosinophil,EOS)计数低于0.05×10~9/L的支气管哮喘患者35例,为EOS降低哮喘组;血中EOS计数在(0.05-0.5)×10~9/L之间的支气管哮喘患者35例,为EOS正常哮喘组;血中EOS计数高于0.5×10~9/L的支气管哮喘患者35例,为EOS升高哮喘组;收集相同时期来本院体检科体检的健康者35例为对照组。记录所有受试者的基本信息,标本均使用酶联免疫吸附试验法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组受试者血清Beclin1、LC3的浓度。采用SPSS 26.0统计学软件对各组数据进行分析,并比较各组患者的基本临床资料及血清Beclin1、LC3水平。分别对血清Beclin1、LC3做二元Logistic回归分析,并绘制受试者工作曲线(Receiver operating characteristic curve,ROC),根据其曲线下面积(Area under the curve,AUC)及约登指数,判断两种因子对哮喘发作的预测价值。相关性采用Pearson法分析,并分别绘制哮喘组血清Beclin1、LC3与血中EOS水平的散点图。(均以α=0.05,P<0.05表示差异有统计学意义为标准)结果(1)针对一般临床资料(包括年龄、性别、身高、体重、BMI)的比较,EOS降低哮喘组、EOS正常哮喘组、EOS升高哮喘组和对照组差异均无统计学意义(P均>0.05)。(2)EOS降低哮喘组、EOS正常哮喘组、EOS升高哮喘组在C反应蛋白(CRP)、中性粒细胞计数(N)、中性粒细胞百分比(N%)、白细胞(WBC)的比较上差异均无统计学意义(P均>0.05)。EOS降低哮喘组、EOS正常哮喘组、EOS升高哮喘组血中EOS计数分别为0.03(0.01,0.04),0.26(0.19,0.31),0.61(0.51,0.79),三组间均值不全相等,且差异均有统计学意义(P均<0.05)。。(3)哮喘组、对照组的血清Beclin1表达水平分别为7.05(6.29,7.70),5.26(4.95,5.49),哮喘组血清Beclin1表达水平明显高于对照组,且差异有统计学意义(P均<0.05)。哮喘组、对照组的血清LC3表达水平分别为1355.36(1219.10,1520.71,1056.15,(1032.06,1136.89),哮喘组血清LC3表达水平明显高于对照组,且差异有统计学意义(P均<0.05)。(4)EOS降低哮喘组、EOS正常哮喘组、EOS升高哮喘组、对照组受试者血清Beclin1水平分别为6.22±0.63ng/m L、6.99±0.58ng/m L、8.00±0.82ng/m L、5.29±0.57ng/m L,四组间均值不全相等,且三个哮喘组血清Beclin1水平显著高于对照组,且EOS升高哮喘组、EOS正常哮喘组血清Beclin1水平显著高于EOS降低哮喘组(P均<0.05),EOS升高哮喘组血清Beclin1水平显著高于EOS正常哮喘组(P均<0.05)。EOS降低哮喘组、EOS正常哮喘组、EOS升高哮喘组、对照组受试者血清LC3水平分别为1170.42±110.52pg/m L、1341.69±133.27pg/m L、1559.61±98.69pg/m L、1066.63±94.94pg/m L,四组间均值不全相等,且三个哮喘组血清LC3水平显著高于对照组,且EOS升高哮喘组、EOS正常哮喘组血清LC3水平较EOS降低哮喘组明显升高(P均<0.05),EOS升高哮喘组血清LC3水平较EOS正常哮喘组明显升高(P均<0.05)。(5)采用Logistic回归分析显示,血清Beclin1、LC3是哮喘发作的独立预测因素(OR值:Beclin1=9.592;LC3=1.007;P<0.05)。然后用ROC曲线评估两个因子对哮喘发作的预测价值,可以看出,血清Beclin1预测哮喘发作的AUC为0.938(95%CI:0.898-0.979,P<0.05),约登指数、灵敏度、特异度分别为0.819、0.905、0.914,临界值为5.923ng/m L;血清LC3预测哮喘发作的AUC为0.893(95%CI:0.841-0.945,P<0.05),约登指数、灵敏度、特异度分别为0.790、0.819、0.971,临界值为1200pg/m L。血清Beclin1、LC3联合预测哮喘发作的AUC为0.953(95%CI:0.921-0.986,P<0.05),约登指数、灵敏度、特异度分别为0.828、0.857、0.971。(6)Pearson法分析显示,哮喘患者血清Beclin1、LC3表达水平与血中嗜酸性粒细胞水平均呈正相关,且相关程度显著(r=0.722、0.809,P<0.05)。且血清Beclin1与LC3表达水平亦呈正相关,且相关程度显著(r=0.769,P<0.05)。结论支气管哮喘患者血清Beclin1、LC3表达水平明显升高,且两者均与血中EOS水平呈正相关,提示血清Beclin1、LC3水平升高可以预测支气管哮喘的急性发作。
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