奶牛子宫内膜炎是造成奶牛繁殖障碍性疾病的重要原因之一,常引起奶牛发情周期延长,不易受胎等症状,严重影响奶牛养殖业的经济效益。所以本试验通过建立一种中药复方,来对奶牛子宫内膜炎产生治疗作用。首先利用网络学,对中药复方的治疗机制进行初步预测;并通过发酵方式,来提高其治疗效果,并通过体外试验进行验证;最终通过临床试验证明该中药复方对奶牛子宫内膜炎的治疗作用。旨在为治疗奶牛子宫内膜炎的中药复方提供参考与科学依据,以减少抗生素的频繁使用。通过查询文献资料以及《中兽医药典》,按药物的剂量以及相互间的联用效果组成药方,最终确定中药组方为丹参、益母草、黄芩、连翘。通过网络药理学,研究该复方中药有效成分治疗奶牛子宫内膜炎的潜在作用靶点,并对靶点作用通路的机制进行阐述。利用TCMSP数据库筛选药物成分作用靶点,从该中药复方中筛出有效活性成分133种,主要包括槲皮素、山奈酚、黄芩素、丹参酮ⅡA等,通过药物成分找到对应靶点蛋白292个。通过NCBI、Gene Card、gene Map、TTD、Drug Bank查找奶牛子宫内膜炎的相关靶点,找到奶牛子宫内膜炎的相关靶点130个,筛选出药物成分靶点与奶牛子宫内膜炎相关靶点的共有基因靶点24个,将其作为该中药复方治疗奶牛子宫内膜炎的预测靶点,并上传到STRING数据库建立蛋白互作（PPI）网络,筛出核心靶点7个,包括肿瘤坏死因子、蛋白激酶、前列腺素内过氧化物合酶2、CSC1样蛋白、细胞肿瘤抗原、白细胞介素1β和白细胞介素6。运用Metascape数据库对核心靶点进行GO功能与KEGG通路富集分析。经分析核心靶点的所有基因通路中参与生物过程的有20条、细胞组分6条、分子功能6条,生物过程的通路主要为白细胞-细胞黏附的正向调节、脂多糖的反应、对无机物的反应、细胞对化学应激的反应、发热反应、对IL-1的反应、炎症反应的调节、对瘤坏死因子、蛋白质磷酸化的正向调控、白细胞与血管内皮细胞黏附的正向调节、僵化、腺体发育细胞因子介导的信号通路、组织重塑、生殖结构发育、消化系统发育、上皮细胞迁移的调节、对病毒的反应、核质转运的正向调节及干细胞分化的调控等;细胞组分显示靶点功能主要作用于细胞膜筏、薄膜侧面、颗粒分泌腔、细胞质核周区、转录调节复合物、胶原细胞外基质;分子功能主要有信号受体活性调节、转录辅激活子的结合、血红素结合、整合素结合、磷酸酶结合、蛋白质同二聚活性调节。KEGG通路富集分析涉及基因20个,参与调控的通路有9条,其中涉及基因较多的有AGE-RAGE信号通路、癌症蛋白聚糖通路、血流剪切应力与动脉粥样硬化通路及Th17细胞分化通路。最终确定该中药复方的治疗作用,为后续试验提供理论依据。通过对中药发酵后有效活性成分黄酮和多糖提高量作为依据,对中药发酵菌种进行筛选,以及利用响应面分析对中药的发酵条件进行优化。最终结果显示鼠李糖乳酸杆菌对中药的发酵效果最好,中药的最佳发酵条件在发酵温度为37℃,接菌量为5%,发酵时间为6天时的黄酮提取量最高,为25.37%。并从患病牛的子宫中提取出致病菌进行抑菌试验,结果显示中药经发酵后,最小抑菌浓度提高了25%。利用小鼠进行药物安全性试验,在药物致敏试验和子宫灌注试验中,小鼠均未出现异常,证明药物安全,符合临床用药标准。临床试验结果显示,复方发酵中药可减少奶牛子宫的中性粒细胞数,从而缓解子宫内膜炎的炎性症状,从B超声像图中可以看出,该药物可通过药物成分促进子宫收缩,减少脓性液体在子宫内的蓄积来对子宫内膜炎产生治疗作用。