【摘 要】
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全沟硬蜱（Ixodes persalcatus）是广泛存在于我国北方林区的一种硬蜱,是黑龙江省的优势蜱种之一,可携带并传播多种病原体,严重威胁人类与动物的健康。但目前关于全沟硬蜱分子分类的研究还相对较少。因此,在黑龙江省林区开展全沟硬蜱的种群分化及遗传多态性的研究具有重要意义。同时对全沟硬蜱携带梨形虫与伯氏疏螺旋体的情况进行调查,为梨形虫病与莱姆病的防控提供可靠数据。本研究于2021年4～8月期间
【基金项目】
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黑龙江八一农垦大学三横三纵支持计划（TDJH202002）； 国家自然科学基金（32072885）；
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全沟硬蜱（Ixodes persalcatus）是广泛存在于我国北方林区的一种硬蜱,是黑龙江省的优势蜱种之一,可携带并传播多种病原体,严重威胁人类与动物的健康。但目前关于全沟硬蜱分子分类的研究还相对较少。因此,在黑龙江省林区开展全沟硬蜱的种群分化及遗传多态性的研究具有重要意义。同时对全沟硬蜱携带梨形虫与伯氏疏螺旋体的情况进行调查,为梨形虫病与莱姆病的防控提供可靠数据。本研究于2021年4～8月期间,在黑龙江省大兴安岭、小兴安岭、完达山、张广财岭和大青山五个林区的12个地点应用布旗法采集游离的全沟硬蜱816只。于每个地点随机选择10只全沟硬蜱,提取DNA,PCR方法分别扩增16S r DNA序列、cox1序列和ITS2序列,进行克隆和测序,进一步进行序列多态性、种群遗传结构和系统发育等分析。同时基于梨形虫18S r DNA序列和伯氏疏螺旋体的5S-23S r DNA片段对采集到的所有全沟硬蜱,应用PCR方法进行检测,随后对阳性样本进行序列分析和统计分析。结果显示:（1）基于全沟硬蜱16S r DNA序列共获得9个单倍型,其中有1个为共享单倍型;基于cox1序列发现25个单倍型,其中含有2个共享单倍型;基于ITS2序列发现73个单倍型,其中有1个单倍型为共享单倍型。（2）全沟硬蜱在不同基因标记下,遗传变异来源不同,种群分化程度不同,单倍型的分布与地域不相关。大部分种群均遵循中性进化原则,只有部分地区经历了种群扩张,在选择压力下进化。（3）全沟硬蜱以16S r DNA、cox1和ITS2序列为标记,分离株单倍型均在同一分支上,并未存在地理相关性。（4）研究中全沟硬蜱携带梨形虫阳性率为4.66%（38/816）,其中巴贝斯虫阳性率为4.17%（34/816）,泰勒虫阳性率为0.49%（4/816）,伯氏疏螺旋体总阳性率为18.26%（149/816）,混合感染为0.613%（5/816）。（5）本研究检测出2种巴贝斯虫,1种泰勒虫和2种伯氏疏螺旋体;分别是猎户巴贝斯虫（Babesia venatorum）、田鼠巴贝斯虫（Babesia microti）、中华泰勒虫（Theileria sinensis）、阿氏疏螺旋体（Borrelia afzelii）和伽氏疏螺旋体（Borrelia garinii）。本研究首次对黑龙江林区全沟硬蜱的遗传多态性进行分析,基于16S r DNA、cox1和ITS2为标记,进行遗传多态性分析,发现其种群间分化程度不等,单倍型分布与地域不相关。种群大多遵循中性进化原则,只有部分地区经历了种群扩张,在选择压力下进化。应用PCR方法对12个采集点全沟硬蜱进行梨形虫和伯氏疏螺旋体的检测,检测出2种巴贝斯虫（Babesia venatorum、Babesia microti）、1种泰勒虫（Theileria sinensis）,2种伯氏疏螺旋体（Borrelia garinii、Borrelia afzelii）,其中猎户巴贝斯虫、田鼠巴贝斯虫、阿氏疏螺旋体和伽氏疏螺旋体为人兽共患病原。
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