根据Genebank上发表的leptin长型受体（Ob-Rb）mRNA基因序列,在其保守区设计一对引物。用Trizole法从小梅山猪和苏姜猪（暂定名）的下丘脑、垂体、卵巢提取RNA,然后用RT-PCR进行cRNA扩增,获得长343bp的目的基因片段,运用T-A克隆法,将此片段连接到pGEM-Easy T载体,通过蓝白斑筛选、EcoRⅠ酶切和序列测定等进行重组质粒鉴定。测序结果表明,获得的目的基因片段与发表的序列同源性100%。用免疫组织化学的方法测定小梅山猪初生、30、60、70、90日龄,苏姜猪初生、60、120、150、180日龄的下丘脑、垂体、卵巢内Ob-Rb的分布及定位。结果显示,Ob-Rb阳性颗粒广泛分布于下丘脑,尤其是弓状核;垂体中Ob-Rb阳性颗粒主要集中于垂体前叶细胞;卵巢中Ob-Rb阳性颗粒出现在各级卵泡的颗粒细胞,而卵母细胞没有阳性颗粒。用荧光定量法测定小梅山猪初生、30、60、70、90日龄,苏姜猪初生、60、120、150、180日龄的下丘脑、垂体、卵巢内Ob-Rb mRNA的相对丰度变化。结果表明,相同猪种同一日龄不同组织Ob-Rb mRNA的表达量在卵巢中最高,下丘脑次之,垂体最少,但总体上,垂体和下丘脑之间差异不显著;同一组织不同日龄的Ob-Rb mRNA在初生时都有较高的水平,之后逐渐下降,小梅山猪在60日龄时开始上升,至70日龄时达峰值;苏姜猪在120日龄时开始上升,至150日龄时升至较高水平。而两个品种的猪在出生时,小梅山猪各个部位Ob-Rb mRNA的表达量显著高于苏姜猪（P>0.01）。酶联免疫法测定5个时期血浆leptin水平,与Ob-Rb mRNA表达呈现出同步性变化,两者显著相关。放射免疫测定（RIA）五个阶段血浆FSH、LH、E₂、P浓度变化规律。结果表明小梅山猪和苏姜猪FSH、LH、E₂初生时浓度很高,且各自显著高于小梅山猪（30、60日龄）、苏姜猪（60、120日龄）激素水平（P <0.01）,之后迅速下降。至初情期时小梅山猪和苏姜猪FSH、LH、E₂浓度均升高,而P的浓度尤其明显。本研究揭示了Ob-Rb在猪下丘脑、垂体、卵巢中的分布定位规律,检测了leptin与Ob-Rb mRNA在猪不同时期的表达变化和各时期多种激素间的相互关系,为研究leptin的生物学作用及其在初情期启动中的作用奠定了基础。