【摘 要】
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目的:提取金银花总多糖,优化其除蛋白工艺;筛选抗病毒活性组分;对抗病毒活性组分进行分离纯化,并初步表征其结构;对不同批次的金银花多糖组分进行指纹图谱研究。方法:1.采用水提醇沉法提取金银花总多糖,响应面法优化金银花多糖的除蛋白工艺,并对金银花总多糖进行分级醇沉。2.对金银花分级多糖进行体外抗病毒活性研究,测定金银花各多糖组分对呼吸道合胞病毒（RSV）的抑制作用。3.采用DEAE-52、Sephad
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目的:提取金银花总多糖,优化其除蛋白工艺;筛选抗病毒活性组分;对抗病毒活性组分进行分离纯化,并初步表征其结构;对不同批次的金银花多糖组分进行指纹图谱研究。方法:1.采用水提醇沉法提取金银花总多糖,响应面法优化金银花多糖的除蛋白工艺,并对金银花总多糖进行分级醇沉。2.对金银花分级多糖进行体外抗病毒活性研究,测定金银花各多糖组分对呼吸道合胞病毒（RSV）的抑制作用。3.采用DEAE-52、Sephadex G50及SephacrylTMS-100凝胶柱对活性多糖进行纯化,超滤脱盐,高效凝胶渗透色谱（HPGPC）对纯化多糖进行分子量及纯度测定,气相色谱（GC）测定金银花各多糖组分的单糖组成及比例,并对金银花多糖进行红外光谱及紫外光谱扫描分析。4.通过GC法对不同批次的金银花多糖进行指纹图谱研究,以确定不同批次的金银花多糖组分的稳定性及相似度。结果:1.金银花多糖最佳除蛋白工艺为:TCA:正丁醇=1:8.5,金银花多糖溶液:TCA-正丁醇溶液=1:3,震摇时间为27 min。金银花粗多糖,经分级醇沉得20%醇沉组分、50%醇沉组分、80%醇沉组分。2.体外抗病毒活性实验结果表明,80%醇沉组分体外抗病毒活性最好,能够显著抑制RSV感染。3.80%醇沉组分经DEAE-52柱色谱分离得到LTP1、LTP2、LTP3、LTP4四个组分,LTP2经凝胶柱色谱分离得到LTP2-G1、LTP2-G2及LTP2-S2三个组分,HPGPC法测定其纯度及分子量,发现LTP2-G1、LTP2-G2都不均一,且得率较低,重均分子量Mw分别为9247、2783,LTP2-S2显示为单一色谱峰,纯度较好,重均分子量Mw为4580。LTP2-S2的GC分析结果显示:其单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,其摩尔比为1.00:2.28:1.03:1.61:6.24:4.28。红外光谱分析结果表明LTP2-S2中有—O-H、-C-H及-C-O-C吸收信号。4.金银花多糖指纹图谱显示12批金银花药材相似度大于0.978,相似度较好,表明组成多糖样品的化学成分的种类基本一致。结论:初步筛选出了金银花抗病毒活性组分;建立了金银花多糖的分离纯化方法及其单糖组成分析方法;指纹图谱研究方法为金银花多糖的质量研究提供了参考。
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