猫杯状病毒(Feline calicivirus, FCV)属于杯状病毒科、水疱疹病毒属的成员，能够引起猫科动物上呼吸道疾病。感染后主要临床症状表现为慢性口腔炎和口腔溃疡，也会引起结膜炎、跛行综合征和全身性疾病的严重临床形式。目前该病的主要预防手段仍是接种疫苗，然而疫苗不能阻止同源或异源FCV变异株的再感染。该病无特异性治疗药物，特异性抗体是治疗的首选生物制品。单克隆抗体由于其高成本也不适于批量化生产。马抗血清制品以其低成本和纯熟的生产工艺备受青睐，在针对某些疾病的治疗中有着不可替代的作用。因此，开展FCV马血清抗体的研究有着重要的意义。
　　本实验将具有较强致病性与良好免疫原性的FCVCH-JL2株毒作为免疫原对马匹进行免疫，从而制备高免血清及精制免疫球蛋白F(ab)2，并对其防治效果进行研究。本研究首先进行了马抗FCV高免血清及F(ab)2的制备与检测，通过超速离心及蔗糖密度梯度离心将FCV浓缩纯化，与弗氏佐剂制备免疫原并对马进行免疫，经病毒中和试验监测马血清中和抗体效价变化，而后将制备的马抗FCV高免血清通过饱和硫酸铵沉淀提取免疫球蛋白IgG，并经胃蛋白酶酶切，Protein-G柱纯化获得高纯度马抗FCV精制免疫球蛋白F(ab)2，对其浓度、纯度、反应活性、中和抗体效价进行检测。结果显示，六免后马抗FCV血清中和抗体效价最高，为1:1230；提纯IgG的最佳酶切条件是37℃酶切2h。Protein-G柱纯化的F(ab)2经SDS-PAGE分析显示，在110KDa左右具有完整的蛋白条带，应用薄层扫描测得其纯度为95.236%。F(ab)2经超滤浓缩后浓度可达13.5mg/mL，通过IFA检测制备的抗体具有较好的反应活性，其抗体中和效价为1:1219，表明所制备的精制免疫球蛋白F(ab)2在体外具有较强的中和FCV感染的能力。同时，对所制备的F(ab)2进行无菌检验及安全性检测均为合格，注射小鼠和猫无不良反应，证明制得的免疫球蛋白F(ab)2安全性良好。将制备的F(ab)2接种于实验猫，研究其在体内对FCV感染的防治效果。根据本实验室建立的动物感染模型，分别在24h前后给实验猫皮下注射不同剂量的免疫球蛋白F(ab)2，并以滴鼻方式进行攻毒，剂量为0.5mL/只。通过对临床症状、体温体重、综合临床评分、排毒量与病毒载量、存活率及组织病理变化的观察与监测，评价免疫球蛋白F(ab)2对FCV感染的防治效果。结果显示，攻毒前后24h分别给予2mg/kg和10mg/kg剂量的F(ab)2能够有效地减轻临床症状；与对照组比，综合临床评分差异显著，存活率升高，排毒量与肺脏及气管中病毒载量有所减少；病理组织学观察其病理变化有所缓解。由此说明，本研究制备的免疫球蛋白F(ab)2对猫体内FCV的感染具有一定的紧急预防和治疗效果。