【摘 要】
:
山羊传染性胸膜肺炎(CCPP)是由山羊支原体山羊肺炎亚种(Mccp)引起的山羊的一种高度接触性传染病,是世界动物卫生组织(OIE)法定报告传染病之一。近几年,我国相继在甘肃、山东等
论文部分内容阅读
山羊传染性胸膜肺炎(CCPP)是由山羊支原体山羊肺炎亚种(Mccp)引起的山羊的一种高度接触性传染病,是世界动物卫生组织(OIE)法定报告传染病之一。近几年,我国相继在甘肃、山东等地分离或检测到CCPP的病原体Mccp,表明该病在我国流行。准确诊断是是防治该病的前提条件之一。目前,国外已报道多种CCPP血清学诊断方法,如补体结合试验、竞争ELISA试验等,但多有诸如操作复杂、重复性或特异性差、需实验室仪器等缺点,尤其不适合于我国动物疾病诊断实际中快速、易于操作和适于基层使用的要求。免疫胶体金技术具有方便快捷、稳定性强、特异、敏感、不需要特殊设备和试剂、结果判断直观、可以保存等优点,在医学和兽医免疫诊断领域应用广泛。因此,本研究运用胶体金免疫层析技术,建立一种快速、简便、灵敏的检测MCCP抗体的方法。
本实验用Mccp全菌为抗原,常规免疫健康家兔,间接血凝试验检测抗体效价达1:1024以上后收集兔血清,然后采用硫酸铵盐析和Protein G抗体纯化柱获得兔抗Mccp多克隆抗体,应用十二烷基硫酸钠一聚丙烯酞胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法检测其纯度;采用MEM-KM2培养基扩大Mccp的培养,经10000 r/min离心菌体,从上清液中提取Mccp荚膜多糖备用。
采用柠檬酸三钠还原法制备25nm的胶体金颗粒,胶体金标记纯化后的Mccp,最佳标记量和最适pH值的测定结果分别为50μg/ml和7.0,低温超速离心法纯化标记好的金标抗原;用纯化的Mccp分泌多糖抗原包被试纸条的检测线,最适划线浓度为2.0 mg/ml,Mccp多克隆抗体用于质控线的包被,最适划线浓度为1.6 mg/ml。检测试纸条对已知阳性和阴性血清进行实验,检测时间约10 min,阳性血清在检测线和质控线出现两条明显的红色条带,检验结果为阳性,而PBS在质控线上出现红色条带,在检测线未出现,检验结果呈阴性,与预期设计的结果相符合。
对试纸条进行了敏感性、重复性、特异性实验。结果显示:血清效价为1:1024的Mccp阳性血清稀释80倍,仍可以检测出来;不同批次试纸条重复检测,结果无明显差异;试纸条不与绵羊肺炎支原体,丝状支原体山羊亚种等血清有交叉反应。本研究所建立的检测抗体的胶体金免疫层析试纸条具有较高的敏感性、重复性和特异性,为Mccp的快速诊断奠定了基础。
其他文献
对科技文献的分析表明,房间矿柱的强度安全系数(推荐的、实际的或设计计算中采用的)多数为1.2~3.0;有时取为4.0~5.0。这样大的变化范围是由于矿山没有可以用来选择矿柱强度安
摘 要: 本文以云南省玉溪市华宁县第二中学初中部为研究对象,采用访问法、文献资料法、观察法,对体育教学俱乐部教學模式进入华宁县第二中学初中部的可行性进行研究分析。本文旨在让体育教学俱乐部进入华宁县第二中学初中部,在华宁县第二中学初中部的师资队伍、场地器材设施,并对传统体育教学模式和体育教学俱乐部的教学特点进行分析后,提出相应的对策,从而让体育教学俱乐部教学模式在华宁县第二中学初中部开展。 关键词
利用峰漂移法微乳液电动色谱,评价了相对淌度在药物脂水分配系数(lg Po/w)测定中的应用.使用5种不同疏水性化合物验证了此法的可行性,与采用淌度的测量结果进行了比较;并应用
摘 要: 在初中体育教学中,教师要深刻领悟新课程理念,全面贯彻落实素质教育的要求,促进学生全面发展,除了向学生传授体育知识、训练体育技能之外,还要对学生进行心理健康干预,促进学生良好意志品质的形成。三门球项目教学是初中体育教学中的重要内容,教师可以从五个方面强化学生的心理健康教育:一是在三门球教学中强化学生的顽强意志教育,二是在三门球教学中鼓励学生勇于尝试探究,三是在三门球教学中增强学生团队合作意
对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(Infectious hypodermal and hematopoietic necrosis, IHHNV),敏感宿主是细角滨对虾(Litopenaeus stylirostris)和凡纳滨对虾(Penaeus van
2b蛋白由PRRSV的ORF2b所表达的结构蛋白,又称为GP2b蛋白,该结构蛋白对PRRSV感染宿主细胞起着重要作用,本研究通过酵母双杂交技术来筛选与PRRSV2b蛋白互作的PAM蛋白,主要研究内容
根据岩石的物理力学性质、各向同性和各向异性,变形可能会平缓地或跳跃式地发生,可能会引起顶底板移近,煤的压出或伴随着弹性能的积聚和岩石破坏形式的能量释放.马凯耶夫煤矿
VCR法免除了人员在顶板下作业,大大提高了采矿的安全性。但是,它依然存在着地压方面的问题,例如:凿岩峒室、采准巷道的稳定性,充填体的工作性态等。针对上述问题,本文论述了
青霉素类抗生素属于β-内酰胺类药物,作为兽药在兽医临床上应用广泛,用于治疗革兰氏阳性菌和阴性菌等。由于药物的不规范使用,导致其在动物性食品中残留,引起动物和人的过敏、死
摘 要: 随着科学技术的迅猛发展,以计算机等多媒体为主的信息技术以不可阻挡之势几乎遍及各行各业。为促进初中阶段教育教学,新课标对中学信息技术课程教学提出了新的要求,教学要发展必须进行改革,小组合作学习是基于边远落后地区实际情况,有效开展信息技术教学的最佳选择,有利于增强学生整体合作学习的意识,提供给学生充分展示自我能力的机会,有效激发学生的学习兴趣,提高教学实效。 关键词: 初中信息技术教学 合