保健食品含有一定量的功效成分,能调节人体的机能,适用于特定人群,但不能用于治疗疾病。因此,保健品中不能含有具有治疗功能的物质,具有治疗作用的为药品并受到管制。在过去的几十年中,保健品的使用在全球范围内有所增加。然而,制造和销售假冒商品、虚假广告以及欺诈性销售之类的非法活动也随之出现,限制了保健品行业的可持续发展。尤其是往保健品中非法添加药品及类似物严重威胁人类健康,因此受到广泛关注。因此,迫切需要开发一种能够对此类化合物进行准确、灵敏和快速检测的方法。本研究中,以西布曲明（SB）,酚酞（PPH）,西地那非（SD）和他达拉非（TDL）为研究对象。建立一种快速且灵敏的检测保健品中非法添加剂的免疫分析方法。首先,设计合成了SB、SD和TDL的半抗原及相应的完全抗原。通过小鼠免疫、细胞融合、细胞培养、ELISA筛选、腹水制备和纯化等步骤,成功制备了SB、SD和TDL的单克隆抗体（m Ab）。SB、PPH、SD和TDL分别选择抗体3D7、3C9、1A2和5A1进行优化,最优条件下四株抗体的半数抑制率(IC50)分别为4.52 ng m L-1、18.14 ng m L-1、0.48 ng m L-1和12.3 ng m L-1。此外,分别建立了胶体金和荧光免疫层析方法。首先在0.01 M PBS（p H 7.4）缓冲液中进行优化,最佳条件下,使用金标抗体（GLM）截流值（cut off）分别是250ng m L-1（TDL）和500 ng m L-1（SB,SD和PPH）,而使用荧光标记抗体（FLM）cut off值分别是100 ng m L-1（TDL）和250 ng m L-1（SB,SD和PPH）。在这项研究中,分别向减肥茶和咖啡中添加SB、PPH、SD和TDL,使用GLM的cut off值分别为250ng m L-1（TDL）和500 ng m L-1（SB,SD和PPH）,而使用FLM的cut off值分别为100 ng m L-1（TDL）和250 ng m L-1（SB,SD和PPH）。在减肥茶和咖啡中分别添加TDL、SD、PPH和SB四种药物,每种药物分别添加4个不同浓度,这四种药物在GLM中添加回收率范围分别为98.2-102.7%、98.0-105.3%、96.2-104.7%和99.5-102.7%,在FLM中为98.4-102.6%、96.0-102.7%、94.7-104.7%和90.7-103.0%。侧流免疫层析方法（LFIA）是方便且快速的,本研究所有结果都可以在10分钟内获得。且结果表明在GLM和FLM中使用LFIA检测实际样本的4种非法添加剂是可靠且灵敏的。