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目的:壬基酚(Nonylphenol,NP),是持久性有机污染物(persistent organic pollutants,POPs)的重要成员之一,具有神经毒性。胎儿和儿童的中枢神经系统(central nervous system,CNS)对POPs具有高度敏感性。小胶质细胞(Microglia,MG)是CNS中重要的固有免疫细胞,可以抵抗外源化学物的入侵。然而,这使得MG成为NP神经毒性作用潜在的靶细胞。MG异常激活时,可过量产生一氧化氮(nitric oxide,NO)和前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2),造成神经系统的损伤。因此,本研究拟探究孕哺期母体NP暴露是否能够激活子代海马中的MG产生过量的NO和PGE2及其可能机制。实验方法:1.体内实验:按染毒剂量将怀孕大鼠随机分成四组:0 mg/kg/day、10 mg/kg/day、50 mg/kg/day和100 mg/kg/day组,对孕鼠进行相应浓度的NP灌胃。于产后第7及21天取仔鼠海马进行试验。使用总一氧化氮试剂盒测定仔鼠海马中NO含量。酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定仔鼠海马中PGE2含量。免疫荧光观察仔鼠海马MG激活情况。Western blot与免疫荧光实验检测TLR4/My D88/NF-κB信号通路与氧化应激相关蛋白表达变化。2.体外实验:建立BV2小胶质细胞系NP暴露模型,并使用TLR4特异性拮抗剂预处理BV2 MG细胞。使用总一氧化氮试剂盒测定培养上清中NO含量。ELISA测定培养上清中PGE2含量。Western blot检测TLR4蛋白表达变化。结果:1.孕哺期NP暴露激活子代海马中的MG。在产后(postnatal day,PND)第7天与PND21,NP处理组仔鼠海马MG激活数量明显增多,MG激活标志物Iba1荧光强度增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。2.孕哺期NP暴露导致子代海马NO分泌升高。在PND7与PND21,NP处理组中仔鼠海马NO表达明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);在PND7与PND21,NP处理组中仔鼠海马中i NOS蛋白表达明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05),免疫荧光显示MG中i NOS表达增加。3.孕哺期NP暴露导致子代海马PGE2分泌升高。在PND7与PND21,NP处理组中仔鼠海马中PGE2表达明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);在PND7与PND21,NP处理组中仔鼠海马中COX-2蛋白表达明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)免疫荧光显示MG中COX-2表达增加。4.孕哺期NP暴露可激活子代海马中TLR4/My D88/NF-κB信号通路。在PND7与PND21,NP处理组中仔鼠海马中TLR4蛋白表达明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);在PND7与PND21,NP处理组中仔鼠海马中My D88和TRAF6蛋白表达明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);在PND7和PND21,孕哺期NP暴露引起仔鼠海马中p65发生核转移;在PND7和PND21,NP处理组中仔鼠海马中p-p65蛋白含量明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05),而p65蛋白表达无明显变化。5.TLR4拮抗剂减少NP诱导BV2小胶质细胞产生的NO和PGE2。50μM NP能引起BV2小胶质细胞分泌的NO、PGE2表达明显升高,结果具有统计学意义(P<0.05),抑制剂预处理的BV2细胞NO、PGE2表达水平明显低于NP处理组,结果具有统计学意义(P<0.05)。6.孕哺期NP暴露引起子代海马中氧化应激产生。在PND21,孕哺期NP暴露引起仔鼠海马中4-HNE表达升高。而在PND7,4-HNE表达无明显变化;在PND21,NP处理组中仔鼠海马中Nrf2和HO-1蛋白表达明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05),而在PND7,Nrf2和HO-1蛋白表达无明显变化。结论:孕哺期母体NP暴露激活子代海马中的MG,使其产生过量的NO和PGE2;而TLR4/My D88/NF-κB信号通路和Nrf2信号通路可能参与调节MG的激活与NO、PGE2的过量产生。