黄颡鱼新的性别连锁标记的开发及性别分化相关基因的鉴定

来源 :中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lho001
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco),隶属鲶形目(Siluriformes)、鲿科(Bagridae)、黄颡鱼属(Pelteobagrus),是我国重要的经济鱼类之一。黄颡鱼为雌雄异体两性生殖鱼类,其雌雄生长速率差异明显,YY超雄黄颡鱼的培育为其XX♀/XY♂性别决定类型理论提供了有力的支持;Pf62-Y和Pf62-X作为黄颡鱼一对性染色体连锁标记,已被运用于黄颡鱼的全雄培育与生产,然而由于这对性别连锁SCAR标记在实际生产运用上有一定的局限性,为了寻找更多更高效准确的标记,以及探索黄颡鱼性别标记所在的性染色体及性别相关基因,我们展开了一系列的研究工作。  利用染色体步移技术,我们获得了黄颡鱼性连锁标记Pf62-Y8kb和Pf62-X5kb基因组序列,序列比对分析结果展现了两者之间显著的遗传差异与分化,在此基础上设计开发了3对新的高效稳定的性别连锁标记:Y1,X1和XY1,通过在黄颡鱼人工养殖群体以及收集的5个不同地理野生群体中的检测和验证,体现出我们新发展的标记的高效性与稳定性,为黄颡鱼遗传性别的鉴定及全雄黄颡鱼性控育种提供了扎实的技术支撑。  为进一步探索黄颡鱼的性染色体及性别决定机理,寻找性别分化相关基因,我们建立了高质量的黄颡鱼BACDNA文库,该文库一共含有80640个克隆,保存于210个384孔板中,平均插入的黄颡鱼基因组片段大小为128 kb,文库空载率<2.5%,覆盖率约为10.5倍的基因组。我们以Pf62-Y标记为出发点,经过两个水平筛选工作获得了7个阳性克隆,我们选取其中#76号克隆进行了BAC全长测序,利用Pf62-Y-BAC进行染色体荧光原位杂交(BAC-FISH)实验,将Pf62-Y定位于黄颡鱼的性染色体,证实了其性染色体的存在,后续结合染色体微分离等手段进一步对其展开研究,为其性染色体的进化及性别决定相关基因的研究提供更多的方向。  结合黄颡鱼性腺转录组数据库,我们从所测的BAC序列中分析比对得到一个含有PDZ结构域的转录本comp147485_c2_seq5,并将其初步命名为inad like基因。通过组织RT-PCR分析发现其mRNA高量表达于精巢组织,然后我们制备YC-inad like多克隆抗体,并在黄颡鱼精巢切片研究其蛋白表达分布情况,免疫组化结果显示INADL主要分布于精原细胞、初级和次级精母细胞。通过Crispr/Cas9基因敲除系统,我们在黄颡鱼中对该基因进行了敲除以探索其在黄颡鱼性腺分化过程的作用,目前筛选得到了突变型P0代;同时,我们对斑马鱼中的同源基因zf-inad like展开了平行研究,通过Cas9系统敲除zf-inadl基因研究其功能,已获得F3代纯合子,从外观上暂未观察到直观表型,仍需进一步的组织切片检测进行更深入的研究。
其他文献
该论文首先介绍了矢量平面波展开方法,对方程的形式进行讨论,并用矢量平面波方法计算了各向同性介质构成的光了晶体的色散关系,分析了光子晶体能带的特点、能带晶体结构参数
西藏高寒草甸海拔较高,地域环境特殊,气候变化复杂,太阳辐射强烈,植被盖度较低。太阳辐射对于土壤的加温较为直接。在一天内,土壤温度的变化较为剧烈。在这种特殊的气候环境下。生
异育银鲫是我国重要的水产养殖种类之一,然而近年来爆发的鲫疱疹病毒(Carassius auratus herpesvirus,CaHV)严重影响了我国鲫鱼养殖产业的发展。我们实验室利用已建立的多种遗
该文重点研究了全球星系统空中接口的关键技术.其中第一章,第二章和第三章分别描述卫星移动通信的发展历程和全球星系统概述以及全球星系统空间星座的组成.第四章,第五章和第
该文主要讨论了交互操作和动画、变换、着色、光照、反走样、混合、雾、位图、显示表、MCI媒体接口.由于靶定位器结构复,此提出了提高图形执地速度的方法.为了能够观察靶定位
非线性动力学电路与系统中的混沌理论是非线性科学研究的前沿课题之一,其中混沌的产生机理、解析预测以及混沌的应用是当前混沌研究的三大热点。论文集文主要探讨了混沌信号在
植物根构型是指同一根系中不同类型的根在生长介质中的空间造型和分布。磷是植物生长发育所必需的营养元素,参与调控植物生长发育的各个阶段。磷有效性对植物根构型具有调控作
甲型流感病毒mRNA的核质转运的机制尤其是不含内含子的mRNA的出核转运途径迄今仍然不是很清楚。而病毒mRNA在宿主细胞内的定位和运动情况的监测分析对于研究病毒mRNA的出核机
该论文以射频识别(RadioFrequencyIdentification,简称RFID)技术的实际应用为背景,以学校就餐管理系统的设计为例,阐述了使用一种典型的带存储器的射频IC卡——TK5550应答器
自从平面肖特基二极管产生以来,就受到了人们的高度关注。平面肖特基二极管具有优异的高频特性和较低的正向开启电压,这些独特的性质使得其在太阳能电池,开关电源、汽车以及手机