性类固醇激素对麝鼠泌香腺功能的调节作用

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动物为了适应野外环境以及确保其后代能够生存,在长期的进化过程中形成了各自独特的繁殖策略,如季节性繁殖等,季节性繁殖现象是在一年特定的季节出现。麝鼠(Ondatra zibethicus)是季节性繁殖动物,其性活跃期为3月到10月,雄性麝鼠尾部附近的腹部肌肉和表面毛皮之间有一对泌香腺,繁殖期的雄性麝鼠泌香腺能够分泌麝鼠香,从而吸引雌性麝鼠交配,这种麝鼠香是昂贵的中药药材。麝鼠泌香腺分泌麝鼠香的能力与其体内性类固醇激素的水平变化密切相关。细胞色素P450芳香化酶(aromatase cytochrome P450, P450arom)在雌激素合成过程中能够催化雄激素转化为雌激素,发挥重要的生理作用。本研究旨在调查繁殖期和非繁殖期麝鼠泌香腺中雄激素受体(androgen receptor, AR)、雌激素受体(estrogen receptor alpha, ERa和estrogen receptor beta, ER(3)和P450arom在麝鼠泌香腺中的免疫定位、免疫活性以及它们分子表达水平的变化,评价雄激素和雌激素对麝鼠泌香腺的调节作用。在繁殖期和非繁殖期分别采集麝鼠泌香腺、睾丸组织及血液样品,对泌香腺和睾丸分别进行形态学与组织学观察、免疫组织化学染色、蛋白免疫印迹分析(Western blotting)以及反转录PCR(reverse transcription PCR, RT-PCR)检测;对血液样本进行激素测定。形态学结果显示繁殖期麝鼠泌香腺和睾丸的重量和大小都明显高于非繁殖期。组织学结果表明,在繁殖期和非繁殖期麝鼠泌香腺中都能观察到腺细胞、间质细胞、上皮细胞和排香管,其中繁殖期的腺细胞较大,且与非繁殖期相比细胞数量多、密度大。免疫组织化学结果发现繁殖期的AR只在泌香腺的腺细胞中有免疫阳性表达;P450arom在腺细胞和上皮细胞中均有免疫阳性发现;ERa在泌香腺的腺细胞、间质细胞和排香导管的上皮细胞中都有阳性表达;ERβ只在主要的腺细胞与上皮细胞中有较弱免疫阳性;而非繁殖期它们只在腺细胞中有表达。此外,免疫印迹实验结果显示繁殖期的AR、P450arorm ERa(?)口ERp的蛋白表达水平均强于非繁殖期。RT-PCR结果与免疫印记的结果呈现一致,AR、P450arom. ERa和ERβ均在繁殖期有较高的mRNA表达。麝鼠血清的激素检测结果显示繁殖期的睾酮(testosterone, T)、卵泡刺激素(follicle stimulating hormone, FSH)和黄体激素(luteinizing hormone, LH)含量均显著高于非繁殖期。上述结果表明,麝鼠泌香腺是雄激素和雌激素的靶器官,雄激素在麝鼠泌香腺既可以通过其受体结合,也可以转化雌激素与雌激素受体结合参与调节麝鼠泌香腺的生理功能。
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