【摘 要】
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目的探讨CA3(CIL56)通过靶向抑制YAP1对肝癌Hep G2细胞增殖及凋亡的影响,并进一步研究其抗肿瘤的作用机制。方法将肝癌Hep G2细胞置于含10%胎牛血清(FBS)的1640培养基中,于37℃、5%CO_2的孵箱中培养。体外培养Hep G2细胞,实验组分别加入不同浓度CA3(0.25、0.5、1.0、2.0、4.0mmol/L)作用24、48 h。增强型CCK8试剂检测经不同浓度CA3
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目的探讨CA3(CIL56)通过靶向抑制YAP1对肝癌Hep G2细胞增殖及凋亡的影响,并进一步研究其抗肿瘤的作用机制。方法将肝癌Hep G2细胞置于含10%胎牛血清(FBS)的1640培养基中,于37℃、5%CO2的孵箱中培养。体外培养Hep G2细胞,实验组分别加入不同浓度CA3(0.25、0.5、1.0、2.0、4.0mmol/L)作用24、48 h。增强型CCK8试剂检测经不同浓度CA3作用后,对Hep G2细胞增殖的影响;流式细胞术检测经不同浓度CA3作用48h后,Hep G2细胞的凋亡率;检测经不同浓度CA3作用48h后,Hep G2细胞内活性氧(ROS)含量的变化;Western Blot法分析经不同浓度CA3作用48h后,Hep G2细胞内YAP1、Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白的表达。结果1、增强型CCK8结果显示,CA3对Hep G2细胞作用相同时间后,随着药物浓度增加,细胞增殖率下降。在作用24和48 h后,各浓度药物处理组与对照组比较,细胞增殖率差异有统计学意义(P<0.05)。CA3作用48h后,组内差异显著,为进一步探讨其机制,选择0.5mmol/L、1.0mmol/L、2.0mmol/L三个浓度进行后续研究。2、流式细胞术结果显示,不同浓度CA3作用Hep G2细胞48 h后,随着药物浓度的增加细胞凋亡率增加,凋亡率由对照组的(15.56%)增加到2.0mmol/L的(58.48%),差异有统计学意义(P<0.05)。3、活性氧(ROS)检测结果显示,不同浓度CA3作用Hep G2细胞48h后,随着CA3药物浓度增加,细胞内ROS含量明显增加。4、Western Blot结果显示,不同浓度CA3作用Hep G2细胞48h后,与对照组相比,随着药物浓度增加,YAP1、Bcl-2表达降低,Bax、Caspase-3表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论CA3可抑制Hep G2细胞增殖并诱导凋亡,其机制可能与细胞内活性氧产量增加、调节YAP1、Bcl-2、Bax及Caspase-3蛋白的表达有关。
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