CircITGA7在胃癌中的表达变化和临床意义

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目的:胃癌是我国乃至全世界范围内最常见的恶性肿瘤之一,且发病率逐年攀升。早期胃癌经治疗后5年生存率高达90%,但胃癌起病隐匿,患者发现时往往已处于进展期甚至晚期,预后较差。因此,我们急需提高胃癌早期的诊断效率并寻找治疗胃癌的新方法。环状RNA(circular RNA,circRNA)在肿瘤的发生和发展过程中发挥了重要的作用。已有研究报道circITGA7在结直肠癌中表达量下降,并能抑制结直肠癌的进展,但其在胃癌中的表达及作用机制尚未得知。本实验旨在探究circITGA7在胃癌中的表达情况及可能的作用机制,给胃癌的早期诊断及治疗提供新的方法和思路。材料与方法:(1)通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测circITGA7在胃癌组织和胃癌细胞中的表达水平,并进一步结合患者的临床病理资料来分析两者之间的相关性,探究circITGA7作为胃癌诊断标志物的潜在价值。(2)通过circITGA7过表达和敲减后的质粒及相应的对照质粒分别转染人胃癌细胞MGC-803和BGC-823,采用流式细胞技术检测细胞凋亡变化,并通过细胞克隆和绘制生长曲线的方法检测circITGA7过表达和敲减后胃癌细胞增殖能力的变化,最后采用qRT-PCR和western blot检测circITGA7对胃癌细胞凋亡和增殖相关基因,以及这些基因所表达蛋白的影响。(3)通过Transwell迁移和侵袭实验检测circITGA7过表达和敲减后,胃癌细胞迁移及侵袭能力的变化情况。采用qRT-PCR和western blot检测过表达和敲减circITGA7后细胞上皮-间质转化(EMT)相关基因及蛋白的表达变化,进而探究circITGA7在胃癌进展过程中可能的作用机制。结果:(1)QRT-PCR检测结果表明circITGA7在胃癌组织及胃癌细胞中的表达水平较对照组显著降低。进一步结合相关临床病理资料显示,circITGA7在胃癌中的表达水平与胃癌患者的肿瘤大小、淋巴结转移及TNM分期显著相关。(2)过表达circITGA7能抑制胃癌细胞的增殖,促进胃癌细胞凋亡,而敲减circITGA7后胃癌细胞增殖能力增强,凋亡被抑制。CircITGA7过表达能促进PARP、caspase-3和P21蛋白的表达而抑制Bcl-2蛋白的表达,敲减circITGA7后则得到相反的结果。(3)Transwell迁移和侵袭实验的结果显示,circITGA7过表达能使胃癌细胞迁移和侵袭的能力减弱,而circITGA7敲减后胃癌细胞迁移和侵袭的能力则得到明显增强。通过qRT-PCR和western blot实验表明,circITGA7能调节TGF-β和Wnt信号通路来抑制胃癌细胞EMT的进程。结论:CircITGA7在胃癌组织和胃癌细胞中表达降低,且表达水平与胃癌患者的肿瘤大小、淋巴结转移及TNM分期显著相关。CircITGA7能抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,促进胃癌细胞凋亡,并通过调节TGF-β和Wnt信号通路来逆转胃癌细胞EMT进程,从而抑制胃癌的发生和发展。因此,circITGA7具有成为胃癌诊断标志物和治疗靶点的潜力。
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