【摘 要】
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本文以AS1.398枯草芽孢杆菌为出发菌株,先分别利用紫外线、等离子体与60Co-γ射线对菌株进行单独照射诱变,然后选择诱变效果较好的等离子体与60Co-γ射线进一步做复合诱变,从
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本文以AS1.398枯草芽孢杆菌为出发菌株,先分别利用紫外线、等离子体与60Co-γ射线对菌株进行单独照射诱变,然后选择诱变效果较好的等离子体与60Co-γ射线进一步做复合诱变,从而得到一株产中性蛋白酶最高的先等离子体后60Co-γ射线处理的ICo 16号诱变菌株。通过单因素以及响应面等分析等实验手段,对诱变菌株的培养基进行了优化。单因素得到的最佳碳源为玉米粉和山芋粉,最佳氮源为豆饼粉和麸皮。响应面法得到最佳发酵培养基组合:总碳源（玉米粉+山芋粉,比例1:1）含量为5.20%,总氮源（豆饼粉+麸皮,比例1.8:1）含量为5.18%,磷酸盐混合液（Na2HPO40.45%+KH2PO40.045%,比例为10:1）为5%。通过单因素和正交优化实验,取得了诱变菌株最佳的发酵工艺条件:影响发酵的四个因素的权重性顺序为温度>pH值>接种量>转速,最适发酵参数为:温度32℃,pH值6.9,接种量为3.5%、转速为220 r/min,与单因素的结果十分相近。经过在公司里生产规模性发酵,产酶单位高于现有水平20%,即最高产酶量可达12.6×103 U·mL-1。
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